猪流行性腹泻病毒(PEDV)ORF3和E蛋白反式互补单轮感染系统及应用

    公开(公告)号:CN115584352A

    公开(公告)日:2023-01-10

    申请号:CN202110763876.1

    申请日:2021-07-06

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,涉及猪流行性腹泻病毒(PEDV)ORF3和E蛋白反式互补单轮感染系统及应用,本发明以临床分离的PEDV GII型毒株HN20的全基因组序列为基础,将PEDV全基因组序列分为A、B、C、D和E共5个片段,分别插入载体pSMART中,同时将A片段中的SapI内切酶酶切位点和E片段中的BsmBI内切酶酶切位点进行同义突变作为分子标记并删除E片段中的ORF3和E基因编码框。将构建的5个重组质粒分别进行酶切,胶回收,体外连接转录后,将转录的RNA电转进诱导表达PEDV ORF3和E蛋白的BHK‑21细胞中,拯救出单轮感染的PEDV病毒。本发明的PEDV ORF3和E蛋白的反式互补单轮感染系统有助于PEDV的抗病毒药物、致病机制以及新型疫苗的研制。

    一种SARS-CoV-2病毒复制子及其构建方法和用途

    公开(公告)号:CN115216452A

    公开(公告)日:2022-10-21

    申请号:CN202110414851.0

    申请日:2021-04-17

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,涉及一种SARS‑CoV‑2病毒复制子、其构建方法及其用途。本发明的SARS‑CoV‑2病毒复制子以SARS‑CoV‑2毒株SH‑01的基因组序列为基础,去除新冠病毒结构蛋白基因S、M、E和辅助蛋白基因ORF3a,ORF6,ORF7a,或者去除SARS‑CoV‑2毒株SH‑01的基因组序列的第21563到第28259的核苷酸序列,并在S基因的TRS下游插入目的基因。本发明的复制子经体外转录后,将RNA转染哺乳动物细胞,可以用于研究SARS‑CoV‑2基因与蛋白功能关系,抗病毒药物筛选和验证以及病毒和宿主因子相互作用的探究工作。

    IFITM3基因的应用
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116622779A

    公开(公告)日:2023-08-22

    申请号:CN202310748136.X

    申请日:2023-06-25

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及IFITM3基因的应用。本发明通过靶向IFITM3基因,敲低或敲除基因的表达,可有效抑制冠状病毒的感染复制;而提高IFITM3基因的表达,可有效增强冠状病毒的感染,可应用于临床毒株的分离和培养、毒种繁殖制备、弱毒疫苗生产、抗病毒药物的筛选、病毒感染复制机理研究。

    猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白反式互补单轮感染系统的构建及应用

    公开(公告)号:CN115572736A

    公开(公告)日:2023-01-06

    申请号:CN202110762447.2

    申请日:2021-07-06

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,涉及猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白反式互补单轮感染系统及应用。本发明以临床分离的PEDV GII型毒株HN20的全基因组序列为基础,将PEDV全基因组序列分为A、B、C、D和E共5个片段,分别插入载体pSMART中,同时将A片段中的SapI内切酶酶切位点和E片段中的BsmBI内切酶酶切位点进行同义突变作为分子标记并删除E片段中的N基因编码框;将构建的5个重组质粒分别进行酶切,胶回收,体外连接转录后,将转录的RNA电转进稳定表达PEDV N蛋白的BHK‑21细胞中,拯救出单轮感染的PEDV病毒。本发明的PEDV N蛋白反式互补单轮感染系统,有助于PEDV的抗病毒药物、致病机制以及新型疫苗的研制。

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