公开(公告)号：CN106867966B

公开(公告)日：2020-11-24

申请号：CN201510922252.4

申请日：2015-12-11

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈力 ,  余欣 ,  王蕾

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N9/10 ,  C12P21/00

Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及一种稳定表达核心α(1,3)岩藻糖基转移酶的脊椎动物细胞系及其制备方法；本发明涉及的哺乳动物细胞系为中国仓鼠卵巢细胞CHO‑K1/CAF13CCTCC C2015182。本发明还涉及所述细胞系的制备方法，包括如下步骤：培养CHO‑K1细胞；取pcDNA3.1(+)‑DYK‑FucTA质粒，转染CHO‑K1细胞，获得转染pcDNA3.1(+)‑DYK‑FucTA质粒的转染细胞；取转染细胞，传代培养，通过抗生素筛选获得细胞克隆；挑取细胞克隆，扩大培养并鉴定，获得强阳性表达细胞克隆，筛选，即得所述细胞系。本发明涉及的哺乳动物细胞系能够稳定表达核心α(1,3)岩藻糖基转移酶，实现了在哺乳动物细胞中获得并生产具有核心α(1,3)岩藻糖基化的N型糖蛋白。

公开(公告)号：CN106867966A

公开(公告)日：2017-06-20

申请号：CN201510922252.4

申请日：2015-12-11

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈力 ,  余欣 ,  王蕾

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N9/10 ,  C12P21/00

Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及一种稳定表达核心α(1,3)岩藻糖基转移酶的脊椎动物细胞系及其制备方法；本发明涉及的哺乳动物细胞系为中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1/CAF13CCTCC C2015182。本发明还涉及所述细胞系的制备方法，包括如下步骤：培养CHO-K1细胞；取pcDNA3.1(+)-DYK-FucTA质粒，转染CHO-K1细胞，获得转染pcDNA3.1(+)-DYK-FucTA质粒的转染细胞；取转染细胞，传代培养，通过抗生素筛选获得细胞克隆；挑取细胞克隆，扩大培养并鉴定，获得强阳性表达细胞克隆，筛选，即得所述细胞系。本发明涉及的哺乳动物细胞系能够稳定表达核心α(1,3)岩藻糖基转移酶，实现了在哺乳动物细胞中获得并生产具有核心α(1,3)岩藻糖基化的N型糖蛋白。