抗凝剂的制备方法、抗凝剂及使用其制备血液涂片的方法

    公开(公告)号:CN104729905B

    公开(公告)日:2017-11-21

    申请号:CN201510172828.X

    申请日:2015-04-13

    Abstract: 本发明提供了一种抗凝剂的制备方法、抗凝剂及使用其制备血液涂片的方法。所述制备方法包括:分别量取肝素钠和蒸馏水,然后将肝素钠充分溶于蒸馏水中,得抗凝剂母液;用低容量注射器稀释抗凝剂母液,得备烘抗凝剂稀释液;用低容量注射器向高容量注射器内定量注入备烘抗凝剂稀释液;将装有备烘抗凝剂稀释液的高容量注射器在40‑60℃烘干备用。使用该抗凝剂制备血液涂片的方法,包括:用装有抗凝剂的高容量注射器采血;混匀采血后的高容量注射器;取步骤f得到的血,用载玻片制备血液涂片。使用本申请提供的抗凝剂的制备方法、抗凝剂及使用其制备血液涂片的方法,没有经验的学生也能够获得清晰的血液涂片,真实的再现了血细胞的形态结构和特征。

    一种筛选非人哺乳动物XY精子差异表达基因的方法

    公开(公告)号:CN102199606B

    公开(公告)日:2012-12-26

    申请号:CN201110055296.3

    申请日:2011-03-09

    Abstract: 本发明公开了一种筛选哺乳动物XY精子差异表达基因的方法,包括下列步骤:流式细胞仪分选X、Y精子;分离纯化X、Y精子mRNA;通过Y精子对X精子扣除杂交获得Y精子对X精子差异表达的mRNA;通过X精子对Y精子扣除杂交获得X精子对Y精子差异表达的mRNA;将得到的差异表达的mRNA采用Super SMART技术扩增,构建Y-X扣除杂交cDNA质粒库,克隆,测序,生物信息学分析。采用该方法得到的mRNA纯度高、完整且浓度高体积小,又是层析柱式的逐级淋洗使cDNA与mRNA吸附得更充分,而且层析柱上的对照cDNA可以反复多次用于扣除杂交反应,同时,操作简单、灵敏、试验时间短、无污染。

    一种用于反刍动物精液长效保存的改良稀释液

    公开(公告)号:CN104585164A

    公开(公告)日:2015-05-06

    申请号:CN201510065462.6

    申请日:2015-02-06

    Abstract: 本发明公开一种用于反刍动物精液长效保存的稀释液,其组成为每100ml双蒸水中含有3-9g三羟基氨基甲烷、5-25ml卵黄、0.5-3g海藻糖、1-4g果糖、10-90mg谷胱甘肽、60-280mg牛血清白蛋白、20-150mg三磷酸腺苷、100-800mg维生素C、0.8-2.8g柠檬酸、10-80万单位青霉素、5-30万单位链霉素、2-10mg超氧化物歧化酶。该稀释液对于羊、牛、鹿等反刍动物的精液低温保存具有良好效果,而且生产方法简单、生产成本低,便于推广应用。

    一种奶牛宫颈粘液中抗精子抗体的检测方法

    公开(公告)号:CN102253203A

    公开(公告)日:2011-11-23

    申请号:CN201110054994.1

    申请日:2011-03-09

    Abstract: 本发明分开了一种奶牛宫颈粘液中抗精子抗体的检测方法,包括1)取奶牛发情盛期的宫颈粘液备用;2)取公牛细管冻精、离心弃上清液,加入EBSS悬浮,将悬浮液铺在预先放有含10%胎牛血清的EBSS的试管底部,培养箱中孵育45min,取上层清液;3)将菠萝蛋白酶液加入室温下化冻宫颈粘液中离心;4)将步骤3)的上清液用EBSS液稀释后加入15μL步骤2)制备的上层清液混匀,覆以20μL石蜡油,孵育30min,凝集精子数计N,精子总数计Nz,以N/Nz≥10%判定为抗精子抗体阳性,<10%为抗精子抗体阴性。该检测方法能够简易、快速检出奶牛群抗精子免疫不孕牛的方法。

    抗凝剂的制备方法、抗凝剂及使用其制备血液涂片的方法

    公开(公告)号:CN104729905A

    公开(公告)日:2015-06-24

    申请号:CN201510172828.X

    申请日:2015-04-13

    Abstract: 本发明提供了一种抗凝剂的制备方法、抗凝剂及使用其制备血液涂片的方法。所述制备方法包括:分别量取肝素钠和蒸馏水,然后将肝素钠充分溶于蒸馏水中,得抗凝剂母液;用低容量注射器稀释抗凝剂母液,得备烘抗凝剂稀释液;用低容量注射器向高容量注射器内定量注入备烘抗凝剂稀释液;将装有备烘抗凝剂稀释液的高容量注射器在40-60℃烘干备用。使用该抗凝剂制备血液涂片的方法,包括:用装有抗凝剂的高容量注射器采血;混匀采血后的高容量注射器;取步骤f得到的血,用载玻片制备血液涂片。使用本申请提供的抗凝剂的制备方法、抗凝剂及使用其制备血液涂片的方法,没有经验的学生也能够获得清晰的血液涂片,真实的再现了血细胞的形态结构和特征。

    一种筛选哺乳动物XY精子差异表达基因的方法

    公开(公告)号:CN102199606A

    公开(公告)日:2011-09-28

    申请号:CN201110055296.3

    申请日:2011-03-09

    Abstract: 本发明公开了一种筛选哺乳动物XY精子差异表达基因的方法,包括下列步骤:流式细胞仪分选X、Y精子;分离纯化X、Y精子mRNA;通过Y精子对X精子扣除杂交获得Y精子对X精子差异表达的mRNA;通过X精子对Y精子扣除杂交获得X精子对Y精子差异表达的mRNA;将得到的差异表达的mRNA采用Super SMART技术扩增,构建Y-X扣除杂交cDNA质粒库,克隆,测序,生物信息学分析。采用该方法得到的mRNA纯度高、完整且浓度高体积小,又是层析柱式的逐级淋洗使cDNA与mRNA吸附得更充分,而且层析柱上的对照cDNA可以反复多次用于扣除杂交反应,同时,操作简单、灵敏、试验时间短、无污染。

    一种鉴定山羊早期胚胎性别的方法

    公开(公告)号:CN102181523A

    公开(公告)日:2011-09-14

    申请号:CN201110054993.7

    申请日:2011-03-09

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定山羊早期胚胎性别的方法,包括1)取少量山羊发情后第7~8天胚胎做为样品;2)将胚胎样品、洗涤、灭菌超纯水煮沸10min、然后5000g离心3min,取上清液直接作为模板进行PCR反应;3)在新的PCR管中加入4μL PCR Mix液、10μmol/L上下游巢式外引物各0.15μL、5μL模板、8μL灭菌超纯水,共20μL,扩增;4)在3μL PCR产物中加入7μL PCRMix和上下游巢式内引物,扩增;5)将扩增产物于1.5%的琼脂糖凝胶电泳,出现两条带者为雄性样品,一条带者为雌性样品。该方法能够稳定地扩增出相应基因序列,具有较高的准确定和敏感性。

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