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公开(公告)号:CN103215238B
公开(公告)日:2014-09-03
申请号:CN201310129324.0
申请日:2013-04-12
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所 , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明公开了一种海洋细菌新型酯酶以及利用该酯酶手性催化3-(4-氟苯基)戊二酸二甲酯生产药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯的方法。将该酯酶基因克隆到表达质粒,转化大肠杆菌Rosetta。由于该酶能在表达菌株中高度可溶性表达,并且表现出良好的耐盐,耐碱,及手性选择性,因此可以作为工业化生产抗抑郁药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯的潜在用酶。通过对其反应条件的优化,可以利用该酶催化3-(4-氟苯基)戊二酸二甲酯进而生产药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯,使其转化率和手性选择性大大提高。
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公开(公告)号:CN107384891A
公开(公告)日:2017-11-24
申请号:CN201710668979.3
申请日:2017-08-08
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
CPC classification number: C12N9/18 , C12Y301/01002
Abstract: 本发明公开了一种深海细菌来源新型耐盐碱性酯酶E84及其编码基因与应用。本发明涉及酯酶基因e84来自深海细菌Altererythrobacter atlanticus 26DY36T,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的酯酶基因经异源表达后,底物为对硝基苯酚己酸酯(C6)时催化活性最高,酶活为50U/mg。酯酶E84酯酶催化水解最适pH为9.5;在0.5mol/LNaCl中仍能保持70%以上活性;在添加有机溶剂甘油或去垢剂TritonX-100条件下,酶学活性增大。该酯酶具有耐盐和碱性的特征,可应用于手性药物合成、废水处理和洗涤工业等碱性含盐条件下的工业生产。
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公开(公告)号:CN102864106A
公开(公告)日:2013-01-09
申请号:CN201210358267.9
申请日:2012-09-24
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明涉及一种采用自创的半固体培养基定向筛选过氧化氢酶高产菌株的方法,以及采用该方法获得的一株海洋过氧化氢酶高产菌。该方法将过氧化氢包含在下层半固体琼脂中,缓慢渗透到上层液体培养基中,持续而稳定地给予上层液体培养基中微生物一定的氧化压力,从而达到定向富集过氧化氢酶高产菌株目的,具有高选择性和高效率特点。从海洋水体中采用半固体培养基定向富集筛选而得一株动性杆菌CGMCC No.6043,该菌具有生长周期短、酶活性高和发酵产酶成本低廉的特点,适合广泛运用于纺织工业、食品工业和废水处理等方面。因此本发明方法和产酶菌株具有广泛的工业使用价值和显著的经济效益前景。
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公开(公告)号:CN107893060A
公开(公告)日:2018-04-10
申请号:CN201711230133.8
申请日:2017-11-29
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明公开了一种海洋细菌来源新型热稳定耐盐耐有机溶剂SGNH家族水解酶AlinE4及其编码基因与应用。本发明涉及水解酶基因aline4来自海洋细菌Altererythrobacter indicus DSM 18604,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的水解酶基因经异源表达后,该水解酶具有酯酶活性,底物为对硝基苯酚丁酸酯(C4)时催化活性最高,酶活为25.8U/mg。AlinE4催化水解最适pH和温度为7.5和40℃;在40、50和60℃中孵育60min后,仍能保持50%以上活性;在有机溶剂和金属离子存在条件下,酶学活性较高。该水解酶具有热稳定性和碱性特征,可应用于洗涤剂、废水处理、精细化工、制药和环境修复等领域高温、含盐和含有机溶剂条件下的工业生产。
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公开(公告)号:CN102864106B
公开(公告)日:2014-04-23
申请号:CN201210358267.9
申请日:2012-09-24
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明涉及一种采用自创的半固体培养基定向筛选过氧化氢酶高产菌株的方法,以及采用该方法获得的一株海洋过氧化氢酶高产菌。该方法将过氧化氢包含在下层半固体琼脂中,缓慢渗透到上层液体培养基中,持续而稳定地给予上层液体培养基中微生物一定的氧化压力,从而达到定向富集过氧化氢酶高产菌株目的,具有高选择性和高效率特点。从海洋水体中采用半固体培养基定向富集筛选而得一株动性杆菌CGMCC?No.6043,该菌具有生长周期短、酶活性高和发酵产酶成本低廉的特点,适合广泛运用于纺织工业、食品工业和废水处理等方面。因此本发明方法和产酶菌株具有广泛的工业使用价值和显著的经济效益前景。
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公开(公告)号:CN103215238A
公开(公告)日:2013-07-24
申请号:CN201310129324.0
申请日:2013-04-12
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明公开了一种海洋细菌新型酯酶以及利用该酯酶手性催化3-(4-氟苯基)戊二酸二甲酯生产药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯的方法。将该酯酶基因克隆到表达质粒,转化大肠杆菌Rosetta。由于该酶能在表达菌株中高度可溶性表达,并且表现出良好的耐盐,耐碱,及手性选择性,因此可以作为工业化生产抗抑郁药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯的潜在用酶。通过对其反应条件的优化,可以利用该酶催化3-(4-氟苯基)戊二酸二甲酯进而生产药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯,使其转化率和手性选择性大大提高。
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