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公开(公告)号：CN102864106B
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201210358267.9
申请日：2012-09-24
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明涉及一种采用自创的半固体培养基定向筛选过氧化氢酶高产菌株的方法，以及采用该方法获得的一株海洋过氧化氢酶高产菌。该方法将过氧化氢包含在下层半固体琼脂中，缓慢渗透到上层液体培养基中，持续而稳定地给予上层液体培养基中微生物一定的氧化压力，从而达到定向富集过氧化氢酶高产菌株目的，具有高选择性和高效率特点。从海洋水体中采用半固体培养基定向富集筛选而得一株动性杆菌CGMCC？No.6043，该菌具有生长周期短、酶活性高和发酵产酶成本低廉的特点，适合广泛运用于纺织工业、食品工业和废水处理等方面。因此本发明方法和产酶菌株具有广泛的工业使用价值和显著的经济效益前景。
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公开(公告)号：CN103215238A
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201310129324.0
申请日：2013-04-12
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明公开了一种海洋细菌新型酯酶以及利用该酯酶手性催化3-(4-氟苯基)戊二酸二甲酯生产药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯的方法。将该酯酶基因克隆到表达质粒，转化大肠杆菌Rosetta。由于该酶能在表达菌株中高度可溶性表达，并且表现出良好的耐盐，耐碱，及手性选择性，因此可以作为工业化生产抗抑郁药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯的潜在用酶。通过对其反应条件的优化，可以利用该酶催化3-(4-氟苯基)戊二酸二甲酯进而生产药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯，使其转化率和手性选择性大大提高。
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公开(公告)号：CN102286441B
公开(公告)日：2012-12-12
申请号：CN201110208211.0
申请日：2011-07-24
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
CPC classification number: Y02E50/13
Abstract: 本发明公开了一种低温酯酶、编码基因及其应用。本发明从太平洋深海沉积物宏基因组文库中筛选获得新的酯酶基因，发现了该基因编码蛋白具有优良的酶学特性，催化水解温度范围为10～50℃，水解的pH值为6.0～9.0。在0～20℃条件下，酶蛋白可保持良好的稳定性，在添加二价离子Mg2+、Mn2+或有机溶剂吐温20和80条件下，酶学活性增大。获得的酯酶基因可克隆到合适的宿主中实现异源表达，实现工业化生产酯酶，可应用于催化水解酯和酶法合成酯产品生产过程中，将会在洗涤剂、印染助剂和生物柴油制备等工艺中显示出重要的经济和社会价值。
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公开(公告)号：CN101451113B
公开(公告)日：2010-10-06
申请号：CN200810121997.0
申请日：2008-11-06
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明涉及一种能生产琼胶酶的新型微生物需钠弧菌(Vibrionatriegens)CGMCC No.2428以及该菌生产琼胶酶的方法。该菌分离自东海沉积物，属于革兰氏阴性菌，好氧生长，最适生长NaCl浓度为5-10g/L，最适生长pH值为7.5，能利用酵母膏、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等多种糖类作为能源与碳源生长，经鉴定该菌属于Vibrio natriegens。V.natriegens CGMCC No.2428生长周期短，7h就达对数生长期，该菌能诱导表达琼胶酶，通过简单的分离方法，可从培养液中收集琼胶酶。本发明提供的琼胶酶制备工艺简单，成本低廉，大量快速，可运用于工业生产或医药领域，以产生琼胶低聚糖。
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公开(公告)号：CN101451113A
公开(公告)日：2009-06-10
申请号：CN200810121997.0
申请日：2008-11-06
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明涉及一种能生产琼胶酶的新型微生物需钠弧菌(Vibrionatriegens)CGMCC No.2428以及该菌生产琼胶酶的方法。该菌分离自东海沉积物，属于革兰氏阴性菌，好氧生长，最适生长NaCl浓度为5－10g/L，最适生长pH值为7.5，能利用酵母膏、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等多种糖类作为能源与碳源生长，经鉴定该菌属于Vibrio natriegens。V.natriegens CGMCC No.2428生长周期短，7h就达对数生长期，该菌能诱导表达琼胶酶，通过简单的分离方法，可从培养液中收集琼胶酶。本发明提供的琼胶酶制备工艺简单，成本低廉，大量快速，可运用于工业生产或医药领域，以产生琼胶低聚糖。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103060244B
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201310022577.8
申请日：2013-01-21
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明涉及一种海洋来源过氧化氢酶高产菌及采用该菌生产过氧化氢酶的方法。从海洋水体中采用半固体培养基定向富集筛选而得一株伊平屋海岭海洋芽孢杆菌（Oceanobacillus？iheyensis），保藏编号为CGMCC？No.6042。该菌经发酵可得过氧化氢酶，酶活高达8677U/mg。该过氧化氢酶制备工艺简单，酶活性高，成本低廉，适合广泛应用于食品、纺织、造纸和环保等领域。因此本发明的产酶菌株和发酵方法有广泛的工业应用价值和显著的经济效益前景。
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公开(公告)号：CN103215238B
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201310129324.0
申请日：2013-04-12
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所 , 中国大洋矿产资源研究开发协会
Abstract: 本发明公开了一种海洋细菌新型酯酶以及利用该酯酶手性催化3-(4-氟苯基)戊二酸二甲酯生产药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯的方法。将该酯酶基因克隆到表达质粒，转化大肠杆菌Rosetta。由于该酶能在表达菌株中高度可溶性表达，并且表现出良好的耐盐，耐碱，及手性选择性，因此可以作为工业化生产抗抑郁药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯的潜在用酶。通过对其反应条件的优化，可以利用该酶催化3-(4-氟苯基)戊二酸二甲酯进而生产药物中间体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯，使其转化率和手性选择性大大提高。
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公开(公告)号：CN103060244A
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201310022577.8
申请日：2013-01-21
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明涉及一种海洋来源过氧化氢酶高产菌及采用该菌生产过氧化氢酶的方法。从海洋水体中采用半固体培养基定向富集筛选而得一株伊平屋海岭海洋芽孢杆菌（Oceanobacillus iheyensis），保藏编号为CGMCC No.6042。该菌经发酵可得过氧化氢酶，酶活高达8677U/mg。该过氧化氢酶制备工艺简单，酶活性高，成本低廉，适合广泛应用于食品、纺织、造纸和环保等领域。因此本发明的产酶菌株和发酵方法有广泛的工业应用价值和显著的经济效益前景。
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公开(公告)号：CN101845447B
公开(公告)日：2012-04-04
申请号：CN201010170690.7
申请日：2010-04-22
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
Abstract: 本发明公开了一种琼胶酶及其编码基因的获取方法。从海洋细菌需钠弧菌(保藏号：CGMCC No.2428)中首次利用多种PCR方法获取该琼胶酶基因aga41，突破了以往通过构建文库筛选琼胶酶基因的传统方法。该琼胶酶基因aga41属于β-琼胶酶中的GH50家族，全长2973bp，编码990个氨基酸，与已知琼胶酶序列相似性最高为49％，为一种新型β-琼胶酶。将本发明的琼胶酶基因克隆到表达载体pET28b上，构建了重组大肠杆菌Rosetta菌株，经异源表达获得的活性重组琼胶酶可应用于工业生产。
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公开(公告)号：CN102286441A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110208211.0
申请日：2011-07-24
Applicant: 国家海洋局第二海洋研究所
CPC classification number: Y02E50/13
Abstract: 本发明公开了一种低温酯酶、编码基因及其应用。本发明从太平洋深海沉积物宏基因组文库中筛选获得新的酯酶基因，发现了该基因编码蛋白具有优良的酶学特性，催化水解温度范围为10～50℃，水解的pH值为6.0～9.0。在0～20℃条件下，酶蛋白可保持良好的稳定性，在添加二价离子Mg2+、Mn2+或有机溶剂吐温20和80条件下，酶学活性增大。获得的酯酶基因可克隆到合适的宿主中实现异源表达，实现工业化生产酯酶，可应用于催化水解酯和酶法合成酯产品生产过程中，将会在洗涤剂、印染助剂和生物柴油制备等工艺中显示出重要的经济和社会价值。
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