公开(公告)号：CN104487586B

公开(公告)日：2017-03-08

申请号：CN201480001911.4

申请日：2014-02-18

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 野中孝裕 ,  万年辉久 ,  鹤井典子

IPC: C12P21/02 ,  C07K14/34 ,  C07K19/00 ,  C12N15/09

CPC classification number: C07K1/30 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36 ,  C07K14/00 ,  C07K14/32 ,  C07K14/34 ,  C07K14/62 ,  C07K14/635 ,  C07K14/815 ,  C07K2319/00 ,  C07K2319/50 ,  C07K2319/70

Abstract: 的溶液分离固体的步骤；以及(4)将步骤(3)中分本发明提供以融合蛋白质的形式、高回收率 离出的固体溶解在溶液中的步骤，所述溶液具有地制造目标蛋白质的方法。本发明涉及一种融合 12以下且比步骤(2)中得到的溶液的pH高0.1以蛋白质的制造方法，所述融合蛋白质是具有自组 上的pH。装能力的蛋白质与目标蛋白质形成的融合蛋白质，所述制造方法包括下述(1)～(4)的步骤：(1)制备包含融合蛋白质的溶液的步骤；(2)将步骤以上的pH的步骤，其中，回收率通过下述计算公式计算：回收率(％)＝[步骤(4)中得到的溶液中融合蛋白质的量/{步骤(4)中得到的溶液中的融(1)中得到的溶液的pH调节至使回收率达到10％

公开(公告)号：CN107532163A

公开(公告)日：2018-01-02

申请号：CN201680023752.7

申请日：2016-04-21

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 松田吉彦 ,  伊藤悠美 ,  鹿岛由香里 ,  山田奈绪子 ,  鹤井典子 ,  板屋宽

IPC: C12N15/09 ,  C07K14/34 ,  C12N1/21 ,  C12P21/00

CPC classification number: C12P21/00 ,  C07K14/34 ,  C07K2319/02 ,  C12N9/12 ,  C12N15/09 ,  C12Y207/13003

Abstract: 开发了改善通过棒状细菌的异源蛋白质的分泌生产的新技术，并因此提供了异源蛋白质的分泌生产方法。培养具有异源蛋白质分泌生产能力并已修饰成保持具有特定突变的phoS基因的棒状细菌，以通过分泌生产来生产异源蛋白质。

公开(公告)号：CN103917656B

公开(公告)日：2016-09-28

申请号：CN201280052867.0

申请日：2012-10-25

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 鹤井典子 ,  板屋宽 ,  菊池庆实

IPC: C12P21/02 ,  C12N15/09 ,  C12R1/13 ,  C12R1/15

CPC classification number: C12P21/02 ,  C07K14/34 ,  C07K2319/02 ,  C07K2319/50 ,  C12N15/77

Abstract: 开发了一种改善棒状杆菌型细菌对异源蛋白质的分泌产生的新技术，从而提供了一种异源蛋白质分泌产生的方法。培养这样的棒状杆菌型细菌来分泌产生异源蛋白质，该细菌具有基因构建体，该构建体包含：在该棒状杆菌型细菌中发挥功能的启动子序列；连接在该启动子序列下游的、在该棒状杆菌型细菌中发挥功能的、编码信号肽的核酸序列；和连接在该编码信号肽的核酸序列下游的、编码包含Gln‑Glu‑Thr的氨基酸序列与所述异源蛋白质所成的融合蛋白质的核酸序列。

公开(公告)号：CN104487586A

公开(公告)日：2015-04-01

申请号：CN201480001911.4

申请日：2014-02-18

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 野中孝裕 ,  万年辉久 ,  鹤井典子

IPC: C12P21/02 ,  C07K14/34 ,  C07K19/00 ,  C12N15/09

CPC classification number: C07K1/30 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36 ,  C07K14/00 ,  C07K14/32 ,  C07K14/34 ,  C07K14/62 ,  C07K14/635 ,  C07K14/815 ,  C07K2319/00 ,  C07K2319/50 ,  C07K2319/70

Abstract: 本发明提供以融合蛋白质的形式、高回收率地制造目标蛋白质的方法。本发明涉及一种融合蛋白质的制造方法，所述融合蛋白质是具有自组装能力的蛋白质与目标蛋白质形成的融合蛋白质，所述制造方法包括下述(1)～(4)的步骤：(1)制备包含融合蛋白质的溶液的步骤；(2)将步骤(1)中得到的溶液的pH调节至使回收率达到10％以上的pH的步骤，其中，回收率通过下述计算公式计算：回收率(％)＝[步骤(4)中得到的溶液中融合蛋白质的量/{步骤(4)中得到的溶液中的融合蛋白质的量+步骤(3)的固体分离后的溶液中融合蛋白质的量}]×100；(3)从步骤(2)中得到的溶液分离固体的步骤；以及(4)将步骤(3)中分离出的固体溶解在溶液中的步骤，所述溶液具有12以下且比步骤(2)中得到的溶液的pH高0.1以上的pH。

公开(公告)号：CN103917656A

公开(公告)日：2014-07-09

申请号：CN201280052867.0

申请日：2012-10-25

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 鹤井典子 ,  板屋宽 ,  菊池庆实

IPC: C12P21/02 ,  C12N15/09 ,  C12R1/13 ,  C12R1/15

CPC classification number: C12P21/02 ,  C07K14/34 ,  C07K2319/02 ,  C07K2319/50 ,  C12N15/77

Abstract: 开发了一种改善棒状杆菌型细菌对异源蛋白质的分泌产生的新技术，从而提供了一种异源蛋白质分泌产生的方法。培养这样的棒状杆菌型细菌来分泌产生异源蛋白质，该细菌具有基因构建体，该构建体包含：在该棒状杆菌型细菌中发挥功能的启动子序列；连接在该启动子序列下游的、在该棒状杆菌型细菌中发挥功能的、编码信号肽的核酸序列；和连接在该编码信号肽的核酸序列下游的、编码包含Gln-Glu-Thr的氨基酸序列与所述异源蛋白质所成的融合蛋白质的核酸序列。