公开(公告)号：CN113444698A

公开(公告)日：2021-09-28

申请号：CN202110307117.4

申请日：2021-03-23

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 小西美和 ,  梶本祥平 ,  萩原佑介 ,  三原康博 ,  中野祥吾 ,  本山智晴 ,  伊藤创平

IPC: C12N9/00 ,  C12N15/52 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明的课题是提供具有优异性质的连接酶突变体。本发明的解决手段是下述(1)、(2)或(3)的连接酶突变体：(1)包含与SEQ ID NO:1的氨基酸序列显示95%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体；(2)包含与SEQ ID NO:2的氨基酸序列显示90%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体；或者(3)包含与SEQ ID NO:3的氨基酸序列显示97%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体。

公开(公告)号：CN119654411A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202380057709.2

申请日：2023-08-02

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 梶本祥平 ,  萩原佑介

IPC: C12N15/11

Abstract: 本发明提供一种寡核酸的制造方法。使用互补链将作为底物的单链寡核酸进行酶连接，来制造作为连接产物的寡核酸，所述互补链中引入了降低在互补链与连接产物之间形成的杂交体的稳定性的部位。

公开(公告)号：CN113439085A

公开(公告)日：2021-09-24

申请号：CN202080014985.7

申请日：2020-02-18

Applicant: 味之素株式会社

Inventor： 高桥大辅 ,  萩原佑介 ,  梶本祥平 ,  小西美和

IPC: C07H21/02

Abstract: 本发明提供siRNA、异源双链寡核苷酸等包含互补部分的寡核苷酸的有效的制造方法。更具体来说，本发明提供包含长度为11～27个碱基的互补部分的修饰寡核苷酸的制造方法，其中，该方法包括：在寡核苷酸连接酶的存在下，对合计4个以上的寡核苷酸原料片段进行处理而生成该修饰寡核苷酸，该合计4个以上的寡核苷酸原料片段相当于将该修饰寡核苷酸在满足下述条件(i)～(v)的片段连接部进行切割的情况下得到的寡核苷酸原料片段：(i)在互补部分的各链侧中分别存在1个以上的片段连接部，并且在该修饰寡核苷酸中存在合计2个以上的片段连接部；(ii)将该修饰寡核苷酸在片段连接部进行切割的情况下，在互补部分中形成突出末端，并且该突出末端的长度为1～10个碱基；(iii)至少1个寡核苷酸原料片段包含修饰核苷酸；(iv)该合计4个以上的寡核苷酸原料片段中的4个寡核苷酸原料片段包含长度为5～25个碱基的互补部分；并且(v)与寡核苷酸原料片段的互补部分的各链侧对应的碱基长度的合计均为11～27个碱基长度。