公开(公告)号：CN105018482B

公开(公告)日：2017-10-24

申请号：CN201510431360.1

申请日：2015-07-21

Applicant: 吉林大学

Inventor： 魏景艳 ,  樊振林 ,  宋健 ,  管徒晨

IPC: C12N15/11 ,  C12N9/08 ,  C12N15/70

Abstract: 一种杂合tRNA及其在制备谷胱甘肽过氧化物酶中的应用，属于生物技术领域，涉及序列SEQ ID No:1～16，其由90个碱基组成，既能够作为硒代半胱氨酸合成的底物tRNA，又能够被大肠杆菌自身的延伸因子EF‑Tu识别。先用基因合成法获得杂合tRNA基因，再合成或扩增GPX基因，将两者组装到同一个能够表达杂合tRNA的分泌型原核表达载体上，转化TAG工程菌，在亚硒酸钠存在下诱导表达，通过常规氨基酸进入肽链的方式将GPX的催化基团Sec引入到蛋白的底物结合部位，赋予其高的GPX的活性。本发明方法简单，酶蛋白活力和产量高、稳定性好，从而解决天然GPX来源有限和性质不稳定问题。

公开(公告)号：CN105018482A

公开(公告)日：2015-11-04

申请号：CN201510431360.1

申请日：2015-07-21

Applicant: 吉林大学

Inventor： 魏景艳 ,  樊振林 ,  宋健 ,  管徒晨

IPC: C12N15/11 ,  C12N9/08 ,  C12N15/70

Abstract: 一种杂合tRNA及其在制备谷胱甘肽过氧化物酶中的应用，属于生物技术领域，涉及序列SEQ ID No:1～16，其由90个碱基组成，既能够作为硒代半胱氨酸合成的底物tRNA，又能够被大肠杆菌自身的延伸因子EF-Tu识别。先用基因合成法获得杂合tRNA基因，再合成或扩增GPX基因，将两者组装到同一个能够表达杂合tRNA的分泌型原核表达载体上，转化TAG工程菌，在亚硒酸钠存在下诱导表达，通过常规氨基酸进入肽链的方式将GPX的催化基团Sec引入到蛋白的底物结合部位，赋予其高的GPX的活性。本发明方法简单，酶蛋白活力和产量高、稳定性好，从而解决天然GPX来源有限和性质不稳定问题。

公开(公告)号：CN107177561A

公开(公告)日：2017-09-19

申请号：CN201710583460.5

申请日：2017-07-18

Applicant: 吉林大学

Inventor： 魏景艳 ,  管徒晨 ,  宋健 ,  吕秀秀

IPC: C12N9/02 ,  C12N9/08 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70

Abstract: 一种兼具谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的双功能抗氧化酶及其制备方法，属于生物技术领域。涉及序列SEQ ID No:1～26，其由GPX和SOD两种酶的氨基酸序列组成，既能分解SOD的底物，又能分解GPX的底物。先用基因合成法获得杂合tRNA基因，再合成或扩增GPX和SOD基因，将两者组装到同一个能够表达杂合tRNA的分泌型原核表达载体上，转化TAG工程菌，在亚硒酸钠存在下诱导表达，通过常规氨基酸进入肽链的方式将GPX的催化基团Sec引入到蛋白的底物结合部位，赋予其高的GPX和SOD活性。本发明方法简单，酶蛋白活力和产量高、稳定性好，具有高效的抗氧化功能。