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公开(公告)号:CN117887762A
公开(公告)日:2024-04-16
申请号:CN202410091956.0
申请日:2024-01-23
Applicant: 吉林大学
Abstract: 猪血凝性脑脊髓炎病毒全长感染性克隆质粒及其构建方法与应用,属于遗传平台技术领域。本发明的构建方法,先消除PBeloBAC11载体上的两个KpnI酶切位点,然后在pBeloBAC11的5'末端引入人巨细胞病毒启动子和猪血凝性脑脊髓炎病毒5'UTR,在pBeloBAC11的3'末端引入猪血凝性脑脊髓炎病毒3'UTR、PolyA、丁型肝炎病毒核酶序列以及牛生长素,并插入多克隆酶切位点,得到修饰的pBeloBAC11载体;再采用八个酶切位点将猪血凝性脑脊髓炎病毒全基因组分割为五个基因片段,并扩增,最后将扩增后的基因片段连接至修饰的pBeloBAC11载体上。该克隆质粒可作为反向遗传平台。
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公开(公告)号:CN114807225B
公开(公告)日:2024-01-16
申请号:CN202210448759.0
申请日:2022-04-26
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , A61K39/275 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供了一种重组DNA疫苗及其重组质粒,DNA疫苗重组质粒包括抗原编码序列和质粒载体,所述抗原编码序列包括串联的羊口疮抗原编码序列和绵羊痘抗原编码序列,所述羊口疮抗原和绵羊痘抗原表达为独立的抗原蛋白。本发明提供了一种羊口疮病毒基因和绵羊痘病毒基因的双基因重组DNA疫苗的构建,以及小鼠免疫效果分析。本发明选择羊口疮病毒B2L(011)基因与绵羊痘病毒P32基因,用自剪切肽P2A将两个基因串联,自剪切肽P2A在真核细胞内发生自剪切,使两个抗原蛋白在真核表达载体pcDNA3.1(+)上独立表达。本发明所制备的重组DNA疫苗在免疫小鼠后也产生了较好的免疫效果,可作为候选疫苗的参考。
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公开(公告)号:CN118320072A
公开(公告)日:2024-07-12
申请号:CN202410482500.7
申请日:2024-04-22
Applicant: 吉林大学
IPC: A61K39/215 , A61P31/14 , C07K14/165 , C12N15/50 , C12N15/85 , C12N15/64
Abstract: 本发明涉及一种猪血凝性脑脊髓炎重组DNA疫苗及其构建方法与应用,属于疫苗技术领域。本发明的猪血凝性脑脊髓炎重组DNA疫苗,为猪血凝性脑脊髓炎NTD的重组DNA疫苗或猪血凝性脑脊髓炎RBD的重组DNA疫苗;所述猪血凝性脑脊髓炎NTD的重组DNA疫苗的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述猪血凝性脑脊髓炎RBD的重组DNA疫苗的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。该重组DNA疫苗免疫小鼠后,诱导高水平的Th1型和Th2型细胞因子分泌,对小鼠起到良好的保护作用且无不良反应,说明本发明的重组DNA疫苗在预防猪血凝性脑脊髓炎具有良好的效果。
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公开(公告)号:CN115433719B
公开(公告)日:2024-10-18
申请号:CN202211234941.2
申请日:2022-10-10
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种用于病毒培养、制备的羊源永生化细胞系。通过将hTERT基因导入羊胚胎鼻甲骨细胞(OFTu),构建成为永生化OFTu细胞系。所述细胞系可用于扩增制备羊传染性脓疱病毒(ORFV)、绵羊痘病毒(SPV)、山羊痘病毒(GPV)、疙瘩皮肤病病毒(LSDV)中的至少一种。本发明提供的羊源永生化细胞系,具有较好的应用、转化前景:(1)细胞系可以持续传代,增殖性能稳定;(2)细胞系对羊传染性脓疱病病毒敏感,感染后收获病毒滴度较高,且病毒形态稳定。同时也对上述其他病毒具有较好的敏感性。使用上述细胞系制备病毒可以降低生产成本、减少批间差异,为获得高质量的疫苗提供保障。
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公开(公告)号:CN113583970B
公开(公告)日:2023-05-12
申请号:CN202110864680.1
申请日:2021-07-29
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种用于预防新冠肺炎或抗新冠肺炎冠状病毒传播、致病的制剂药物,包括病毒抗原成分,所述病毒抗原成分为羊传染性脓疱病毒(ORFV)。在本发明中ORFV灭活毒在用药局部激活髓系来源的巨噬细胞,巨噬细胞可以迁移至冠状病毒尤其是新型冠状肺炎病毒SARS‑CoV‑2的靶向组织器官,进行游离病毒的清除或抑制病毒从鼻甲中排除。从而降低鼻洗液(游离于鼻甲外的病毒)中的病毒滴度,进而阻断病毒通过气溶胶进行传播。同时降低肺脏内的病毒滴度,进而减少新冠病毒对肺脏的损伤作用。并且起到加快病毒在体内的清除的作用。
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公开(公告)号:CN115671145A
公开(公告)日:2023-02-03
申请号:CN202110864754.1
申请日:2021-07-29
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种用于预防和抗嗜神经性病毒感染(尤其是PHEV)的药物及其制备方法,包括病毒成分,所述病毒为羊传染性脓疱病毒。本发明所述药物:减少嗜神经性病毒在脑内的载量,进一步优选的通过静脉注射的方式控制PHEV在脑内的载量;抑制嗜神经性病毒对个体的感染,降低发病率;减少嗜神经性病毒感染导致的致死率;缓解、减轻、抑制嗜神经性病毒感染后机体的症状;提高机体对嗜神经性病毒的抗感染力,起到预防的作用。
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公开(公告)号:CN114807225A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210448759.0
申请日:2022-04-26
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , A61K39/275 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供了一种重组DNA疫苗及其重组质粒,DNA疫苗重组质粒包括抗原编码序列和质粒载体,所述抗原编码序列包括串联的羊口疮抗原编码序列和绵羊痘抗原编码序列,所述羊口疮抗原和绵羊痘抗原表达为独立的抗原蛋白。本发明提供了一种羊口疮病毒基因和绵羊痘病毒基因的双基因重组DNA疫苗的构建,以及小鼠免疫效果分析。本发明选择羊口疮病毒B2L(011)基因与绵羊痘病毒P32基因,用自剪切肽P2A将两个基因串联,自剪切肽P2A在真核细胞内发生自剪切,使两个抗原蛋白在真核表达载体pcDNA3.1(+)上独立表达。本发明所制备的重组DNA疫苗在免疫小鼠后也产生了较好的免疫效果,可作为候选疫苗的参考。
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公开(公告)号:CN109517926A
公开(公告)日:2019-03-26
申请号:CN201811282339.X
申请日:2018-10-31
Applicant: 吉林大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明公开了一种同步检测四种猪冠状病毒的多重RT-PCR方法,PHEV、PEDV、TGEV、PDCoV的RT-PCR引物;一种同步检测四种猪冠状病毒的RT-PCR试剂盒,它包括:所述的同步检测四种猪冠状病毒PHEV、PEDV、TGEV、PDCoV的RT-PCR引物;一种同步检测四种猪冠状病毒的RT-PCR反应体系,其中引物对的摩尔比为PHEV:PEDV:TGEV:PDCoV=5:3:5:5;本发明的优点是:多重性:可同时检测和区分PHEV、PEDV、TGEV和PDCoV 4种猪冠状病毒,有利于混合感染的及时诊断;特异性:检测引物具有特异性,大大提高了检测效率;节约资源:节约了扩增体系中各试剂的使用量,降低检测成本。
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公开(公告)号:CN114657154B
公开(公告)日:2024-01-12
申请号:CN202011528341.8
申请日:2020-12-22
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N7/04 , C12N15/63 , A61K39/275 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供了一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法,通过将目标基因突变的方式制备,所述目标基因为羊传染性脓疱病毒ORF120基因。所述缺失ORF120基因的羊传染性脓疱病毒是采用基因工程手段,利用同源重组的方法从ORFV‑SY17分离株全基因组中敲除ORF120基因,以此达到毒力减弱的目的,并以绿色荧光蛋白EGFP作为标记蛋白代替缺失的基因,命名为ORFV‑SY17Δ120减毒株。在此基础上,拯救出其互补株ORFV‑SY17‑Rv120,并以红色荧光蛋白RFP作为筛选标识。经过本源动物羔羊动物接种实验表明,本发明所述的ORF120单基因缺失羊传染性脓疱病毒减毒株具有良好的使用安全性,为羊传染性脓疱病毒减毒活疫苗的开发以及ORF120基因功能的探究提供技术支持。
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公开(公告)号:CN115433719A
公开(公告)日:2022-12-06
申请号:CN202211234941.2
申请日:2022-10-10
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种用于病毒培养、制备的羊源永生化细胞系。通过将hTERT基因导入羊胚胎鼻甲骨细胞(OFTu),构建成为永生化OFTu细胞系。所述细胞系可用于扩增制备羊传染性脓疱病毒(ORFV)、绵羊痘病毒(SPV)、山羊痘病毒(GPV)、疙瘩皮肤病病毒(LSDV)中的至少一种。本发明提供的羊源永生化细胞系,具有较好的应用、转化前景:(1)细胞系可以持续传代,增殖性能稳定;(2)细胞系对羊传染性脓疱病病毒敏感,感染后收获病毒滴度较高,且病毒形态稳定。同时也对上述其他病毒具有较好的敏感性。使用上述细胞系制备病毒可以降低生产成本、减少批间差异,为获得高质量的疫苗提供保障。
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