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公开(公告)号:CN102967496A
公开(公告)日:2013-03-13
申请号:CN201210496064.6
申请日:2012-11-28
Applicant: 吉林大学
IPC: G01N1/28
Abstract: 一种适用于双向电泳的淋巴细胞蛋白样品制备方法属疾病发病机制研究技术领域,本发明包括下列步骤:取新鲜大鼠脾脏研磨,200目过滤,加4℃氯化钠2ml,入试管,再加淋巴细胞分离液2ml,离心,得单个核细胞;加双蒸水2ml,使RBC快速裂解,再加1.8%氯化钠2ml,恢复等渗状态,4℃生理盐水洗涤细胞后,去上清;加4℃5%的蔗糖2ml混匀,离心、去上清;细胞团室温干燥,加水化/裂解缓冲液,促进蛋白的溶解,超声破碎细胞,取上清,即得适用于双向电泳的淋巴细胞蛋白样品。采用本发明制备淋巴细胞蛋白样品快速、简单,成本低,可获得高质量、重复性好的双向电泳图谱,且便于后续进行生物质谱分析鉴定蛋白研究,可广泛应用于淋巴细胞蛋白质组学研究。
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公开(公告)号:CN1193232C
公开(公告)日:2005-03-16
申请号:CN03127631.8
申请日:2003-07-16
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明的夹心免疫传感法检测小分子蛋白质及肽类的方法属免疫检测领域,特别涉及一种定量检测分子量在20kDa以下蛋白质及肽类的方法。是以镀有金膜的载玻片或三棱镜为检测基片,经组装体形成、第一抗体-抗原二元免疫复合物的形成、第一抗体-抗原-第二抗体夹心三元免疫复合物的形成、共振波长检测等过程完成的。待测抗原是胰岛素、bFGF、T3或T4等;相应的第一抗体和第二抗体应为特异性抗每种待测抗原的单克隆第一抗体和第二抗体,且它们具有互补性。本发明可实时监测生物分子的动态反应过程,能简易直接检测待测物浓度的变化;灵敏度高,无背景干扰;试剂成本低。第二抗体的结合产生了更强的光学信号,发挥了生物学放大作用。
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公开(公告)号:CN1480731A
公开(公告)日:2004-03-10
申请号:CN03127631.8
申请日:2003-07-16
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明的夹心免疫传感法检测小分子蛋白质及肽类的方法属免疫检测领域,特别涉及一种定量检测分子量在20kDa以下蛋白质及肽类的方法。是以镀有金膜的载玻片或三棱镜为检测基片,经组装体形成、第一抗体-抗原二元免疫复合物的形成、第一抗体-抗原-第二抗体夹心三元免疫复合物的形成、共振波长检测等过程完成的。待测抗原是胰岛素、bFGF、T3或T4等;相应的第一抗体和第二抗体应为特异性抗每种待测抗原的单克隆第一抗体和第二抗体,且它们具有互补性。本发明可实时监测生物分子的动态反应过程,能简易直接检测待测物浓度的变化;灵敏度高,无背景干扰;试剂成本低。第二抗体的结合产生了更强的光学信号,发挥了生物学放大作用。
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