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公开(公告)号:CN108546717A
公开(公告)日:2018-09-18
申请号:CN201810460165.5
申请日:2018-05-15
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/90
Abstract: 本发明公开了一种反义lncRNA介导顺式调控抑制靶基因表达的方法,利用lncRNA具有竞争内源靶RNA的作用,通过CRISPR Cas9基因编辑方法以RNA作为基因组定位工具在靶基因上插入强启动子,通过大量合成一条与靶基因互补的反义lncRNA,实现原位顺式竞争抑制内源靶基因的表达,为一种反义lncRNA介导顺式(cis)调控抑制基因表达的方法。首先构建靶向载体和同源模板链供体载体,将构建的载体同时转染入宿主细胞,通过嘌呤霉素和更昔洛韦共筛选目标克隆,最后对靶基因表达进行检测及功能研究。