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公开(公告)号：CN114672524B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202210336097.8
申请日：2022-03-30
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明适用于生物催化合成技术领域，提供了一种催化非天然氨基酸衍生物的双功能血红素蛋白，所述双功能血红素蛋白为野生型VHb基因的突变株Q53HL62W‑L75S‑V132E，命名为VHbDF3；其中，所述VHb的基因序列如SEQ ID NO.1所示，所述VHbDF3是将SEQ ID NO.1所示的氨基酸残基第53位的谷氨酰胺突变为组氨酸，然后将第62位亮氨酸突变成色氨酸，再然后将第75位亮氨酸突变成丝氨酸，第132位缬氨酸突变成谷氨酸。通过级联反应可高效合成非天然氨基酸类化合物。同时，该发明中的生物催化系统相比于传统化学合成方法更加高效绿色，催化剂用量少，底物的价格低廉，弥补了传统化学法的缺陷，并为蛋白在催化非天然反应的应用中开阔了新的应用前景。
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公开(公告)号：CN116004637A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202210667444.5
申请日：2022-06-13
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种双酶系统催化2‑烷基、芳基苯并噁唑衍生物的方法，包括以下步骤：步骤1：通过第53位、第54位定点突变技术改造VHb的基因，提升其催化性能；步骤2：通过E.coli RP523菌株生物表达的方法，将VHb中原始血红素辅基替换为其他金属卟啉，进一步提升催化活力；步骤3：将VHb人工金属酶‑尿素酶应用于双酶系统催化级联反应合成2‑烷基/芳基取代苯并噁唑。该方法通过级联反应可高效合成2‑烷基/芳基取代苯并噁唑化合物。同时，该发明中的生物催化系统相比于传统化学合成方法更加绿色环保，催化剂用量少，底物的价格低廉，弥补了传统化学法的缺陷，并为蛋白在催化非天然反应的应用中开阔了新的应用前景。
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公开(公告)号：CN114672524A
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN202210336097.8
申请日：2022-03-30
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明适用于生物催化合成技术领域，提供了一种双功能血红素蛋白催化非天然氨基酸衍生物的方法，包括以下步骤：步骤1：通过第53位定点饱和突变和全序列易错PCR诱变技术改造VHb的基因，所述VHb的基因序列如SEQ ID NO.1所示；步骤2：根据特定的改造目的，经过多轮随机突变，筛选出有价值的高效催化合成非天然氨基酸的VHb突变体；步骤3：将筛选出的VHb突变体应用于催化级联反应合成非天然氨基酸。该方法通过级联反应可高效合成非天然氨基酸类化合物。同时，该发明中的生物催化系统相比于传统化学合成方法更加高效绿色，催化剂用量少，底物的价格低廉，弥补了传统化学法的缺陷，并为蛋白在催化非天然反应的应用中开阔了新的应用前景。
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