一种基于RPA-CRISPR/Cas12a体系检测肝片吸虫的试剂盒

    公开(公告)号:CN119020506A

    公开(公告)日:2024-11-26

    申请号:CN202411389082.3

    申请日:2024-10-08

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种基于RPA‑CRISPR/Cas12a体系检测肝片吸虫的试剂盒,包括基于肝片吸虫ITS2基因保守序列位置设计的一对RPA引物、Cas12a蛋白、基于ITS2基因保守位点设计的crRNA、CRISPR/Cas12a蛋白反应缓冲液、荧光探针、侧向流试纸条探针和CRISPR单系统检测试纸条;基于肝片吸虫ITS2基因保守序列所设计的RPA引物序列如SEQ ID NO.1~14所示,基于ITS2基因保守位点设计的crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.15~20所示;本试剂盒不需要专业的实验室和昂贵的设备仪器,非常适合于在资源有限的地区或者条件简陋的实验室进行快速检测。

    基于RPA-CRISPR/Cas12a系统的华支睾吸虫可视化快速检测试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN116254349A

    公开(公告)日:2023-06-13

    申请号:CN202211646024.5

    申请日:2022-12-20

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了基于RPA‑CRISPR/Cas12a系统的华支睾吸虫可视化快速检测试剂盒及方法,试剂盒包括:一对用于扩增华支睾吸虫COX‑1基因保守序列的特异性RPA引物、Cas12a蛋白、用于CRISPR/Cas12a反应的缓冲液、crRNA、荧光报告基团、侧向流免疫层析报告基团以及Cas12/13通用侧向流免疫层析试纸条。其中,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO:10和15所示,用于CRISPR/Cas12a反应的crRNA互补的DNA核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示;本发明快速、灵敏、特异性良好且结果肉眼可视,可作为一种临床检测华支睾吸虫感染的方法,对实验设备要求较低,尤其适合在野外环境进行快速、准确的检测,为基层监控和诊断华支睾吸虫病提供了良好的技术手段。

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