公开(公告)号：CN104357423A

公开(公告)日：2015-02-18

申请号：CN201410692025.2

申请日：2014-11-26

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 毕云枫 ,  姜仁凤 ,  沈明浩 ,  徐琳琳 ,  陈萍

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/24 ,  C12N15/70

Abstract: 一种利用D-乳糖醇代替IPTG实现重组蛋白高效诱导表达的方法，属于基因工程药物制备技术领域。其是取活化及扩培后的果糖苷酶工程菌的菌液按2～5％(v/v)的接菌量接种接种于LB液体培养基，37℃，180～220r/min过夜培养；当菌液的紫外吸光值OD600为0.3～0.5时，添加诱导剂D-乳糖醇，使D-乳糖醇的终浓度为0.4～1.4mmol/L，然后在32～40℃条件下诱导3～8h，从而实现重组蛋白的高效诱导表达。实验表明D-乳糖醇为诱导剂与IPTG诱导效果无差异，D-乳糖醇为食品添加剂，无毒性，不被菌体降解，不需多次添加，因此乳糖醇可以代替IPTG作为以Lac为启动子的基因工程重组蛋白的理想诱导剂。

公开(公告)号：CN104357423B

公开(公告)日：2017-04-12

申请号：CN201410692025.2

申请日：2014-11-26

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 毕云枫 ,  姜仁凤 ,  沈明浩 ,  徐琳琳 ,  陈萍

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 一种利用D‑乳糖醇代替IPTG实现重组蛋白高效诱导表达的方法，属于基因工程药物制备技术领域。其是取活化及扩培后的果糖苷酶工程菌的菌液按2～5％(v/v)的接菌量接种接种于LB液体培养基，37℃，180～220r/min过夜培养；当菌液的紫外吸光值OD600为0.3～0.5时，添加诱导剂D‑乳糖醇，使D‑乳糖醇的终浓度为0.4～1.4mmol/L，然后在32～40℃条件下诱导3～8h，从而实现重组蛋白的高效诱导表达。实验表明D‑乳糖醇为诱导剂与IPTG诱导效果无差异，D‑乳糖醇为食品添加剂，无毒性，不被菌体降解，不需多次添加，因此乳糖醇可以代替IPTG作为以Lac为启动子的基因工程重组蛋白的理想诱导剂。