一种蛋白质定向进化的方法
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116926060A

    公开(公告)日:2023-10-24

    申请号:CN202310652836.9

    申请日:2023-06-02

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明提供一种蛋白质定向进化的方法,包括:1)构建筛选质粒,所述筛选质粒的结构为luxpR启动子1‑核糖体结合位点‑luxR‑终止子‑luxpR蛋白基因‑核糖体结合位点‑细菌裂解蛋白基因lysis‑终止子‑luxpR启动子2‑核糖体结合位点‑目的蛋白基因‑终止子;2)采用易错PCR扩增目的蛋白基因得易错PCR产物;3)通过酶连反应将筛选质粒和易错PCR的产物连接,构建重组质粒;4)将重组质粒转化感受态细胞,涂布至含有目的蛋白基因的底物和抗生素的平板上,培养一段时间,筛选出含目的蛋白基因的突变株;5)对筛选出的含目的蛋白基因的突变株表达的突变蛋白进行测序,获得突变蛋白的序列。本发明的方法极大程度减少了蛋白质筛选工作时间和工作量。

    一种厌氧培养装置及其应用

    公开(公告)号:CN108251299B

    公开(公告)日:2021-01-15

    申请号:CN201810106626.9

    申请日:2018-02-02

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种厌氧培养装置及其应用,装置包括厌氧系统、发酵系统和控制系统;所述厌氧系统和发酵系统间通过管路连接,形成厌氧的气体循环,所述控制系统以分组形式实现单独控制各罐体的pH和温度条件;分组的模块化组装,操作便捷,实验过程重复性强,应用范围广,特别适合体外肠道菌群培养和厌氧菌的代谢进化研究。

    一种基于丁酸梭菌的1,3-丙二醇和乳酸联产的发酵生产方法

    公开(公告)号:CN108456698B

    公开(公告)日:2020-10-09

    申请号:CN201810202334.5

    申请日:2018-03-12

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于丁酸梭菌的1,3‑丙二醇和乳酸联产的发酵生产方法,在发酵培养基中添加活性炭进行发酵生产,通过该活性炭对发酵副产物的吸附,解除副产物抑制作用,同时,对发酵液中甘油浓度进行检测,通过流加培养基将发酵过程中菌体生长处于稳定期的甘油浓度控制在5~15g/L,其中活性炭的添加量为每升发酵培养基添加30~100g活性炭。

    一种利用活性包涵体制备光学纯L-叔亮氨酸的方法

    公开(公告)号:CN107858384B

    公开(公告)日:2020-10-09

    申请号:CN201711094066.1

    申请日:2017-11-08

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 方柏山 张永辉

    Abstract: 本发明公开了一种利用活性包涵体制备光学纯L‑叔亮氨酸的方法,包括如下步骤:(1)制备双功能酶活性包涵体,该双功能酶活性包涵体的活性成分为一融合双功能酶,该融合双功能酶包括通过连接肽相连的一亮氨酸脱氢酶(leucine dehydrogenase,LeuDH)部和一用于辅酶NAD+再生的多聚酶部;(2)将上述双功能酶活性包涵体加入pH 6.0~10.0的反应混合液重悬,然后于20~40℃反应,反应期间控制pH为6.0~10.0;所述反应混合液包含50~1000mM三甲基丙酮酸、50‑1000mM甲酸铵和0.05~5mM的辅酶NAD+。

    一种海洋菌株及其胺脱氢酶催化制备手性胺的方法

    公开(公告)号:CN105567756B

    公开(公告)日:2019-06-14

    申请号:CN201610069548.0

    申请日:2016-02-01

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种海洋菌株及其胺脱氢酶催化制备手性胺的方法,属于生物法不对称合成手性化合物技术领域。本发明筛选得到来源于海洋的巴利阿里假单胞菌(Pseudomonas balearica),在加入底物酮、氨基供体和辅助底物情况下,利用该菌株的全细胞及粗酶液催化酮不对称还原胺化制备手性胺。本发明确定了该菌株全细胞催化和粗酶液催化的不对称还原胺化的反应体系和反应条件。本发明在生物催化制备手性胺领域具有较好的工业应用前景,对于今后海洋新型生物催化剂的开发和手性胺的绿色合成方法的研究具有重要意义。

    一种苹果酸脱氢酶PbMDH及其编码序列和应用

    公开(公告)号:CN109337879A

    公开(公告)日:2019-02-15

    申请号:CN201811573414.8

    申请日:2018-12-21

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明提供一个来自于蒌叶假单胞菌Pseudomonas beteli的苹果酸脱氢酶PbMDH,该苹果酸脱氢酶的编码基因及其应用。本发明提供的带有苹果酸脱氢酶PbMDH核苷酸序列的克隆质粒可以通过转导、转化、结合转移的方法转入工程菌中,通过调节所述编码基因的表达,能够高效表达苹果酸脱氢酶PbMDH,为苹果酸脱氢酶的生产提供有效途径。本发明提供的海洋来源的苹果酸脱氢酶具有耐盐耐高温的性能,具有重要的工业化应用前景。

    一种以微流控芯片为载体的微型电化学检测装置

    公开(公告)号:CN108956723A

    公开(公告)日:2018-12-07

    申请号:CN201810494454.7

    申请日:2018-05-22

    Applicant: 厦门大学

    CPC classification number: G01N27/26 G01N27/30

    Abstract: 本发明涉及一种以微流控芯片为载体的微型电化学检测装置,包括:微流控芯片、托盘、电机及电化学检测装置;所述电化学检测装置与所述电机相连以控制转速;所述微流控芯片嵌入所述托盘中;所述托盘中部插入电机转轴;所述电机旋转时所述托盘带动所述微流控芯片旋转。本发明的基于离心力驱动的微流控芯片及其托盘,用于待测液体的预处理及短时储存,结合所述电化学检测装置中微处理器、检测电极、恒电位电路、电流‑电压转换电路及多档位放大电路,可以快捷、方便、准确地检测出某种物质的含量。

    一种基于丁酸梭菌的1,3-丙二醇和乳酸联产的发酵生产方法

    公开(公告)号:CN108456698A

    公开(公告)日:2018-08-28

    申请号:CN201810202334.5

    申请日:2018-03-12

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于丁酸梭菌的1,3-丙二醇和乳酸联产的发酵生产方法,在发酵培养基中添加活性炭进行发酵生产,通过该活性炭对发酵副产物的吸附,解除副产物抑制作用,同时,对发酵液中甘油浓度进行检测,通过流加培养基将发酵过程中菌体生长处于稳定期的甘油浓度控制在5~15g/L,其中活性炭的添加量为每升发酵培养基添加30~100g活性炭。

    一种基于丁酸梭菌的1,3-丙二醇的发酵生产方法

    公开(公告)号:CN107574189A

    公开(公告)日:2018-01-12

    申请号:CN201710895670.8

    申请日:2017-09-27

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于丁酸梭菌的1,3-丙二醇的发酵生产方法,在发酵培养基中添加活性炭进行发酵生产,通过该活性炭对发酵产物的吸附,解除产物抑制作用,从而提高菌体活性和1,3-丙二醇生产强度,其中活性炭的添加量为每升发酵培养基添加30~100g活性炭。与未添加活性炭相比,本发明的1,3-丙二醇产率得到较大的提升。

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