公开(公告)号：CN115896115A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211301518.X

申请日：2022-10-24

Applicant: 厦门大学

Inventor： 石松林 ,  朱新乐 ,  冯娴 ,  刘宽灿 ,  杨玲

IPC: C12N15/115 ,  C07K14/00 ,  C12N15/85 ,  C07K7/06 ,  G01N33/68 ,  G01N33/58 ,  A61K38/16 ,  A61K38/08 ,  A61P1/16 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了靶向NPM蛋白的肽适配子及其多肽药物和应用。本发明公开了四个靶向结合NPM蛋白的肽适配子序列，亲和性高、特异性强，动物实验显示其具有抗肿瘤生长、抑制肝纤维化等功能。因此，本发明极具应用价值。本发明通过双分子荧光互补技术，从高通量文库中筛选获得了靶向结合NPM蛋白的候选肽适配子；利用免疫共沉淀技术，确定了能靶向结合NPM蛋白的特异肽适配子；利用靶向结合NPM蛋白的肽适配子序列，体外合成了能透膜进入细胞的小分子多肽药物sp10和sp177；利用肝癌细胞的皮下移植瘤技术，确证了sp10具有抗肿瘤生长的作用；利用肝星状细胞模型和肝纤维化小鼠模型，证实了sp177具有抑制肝星状细胞迁移能力、抑制小鼠肝纤维化进展的作用。

公开(公告)号：CN116987659A

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202310957397.2

申请日：2023-08-01

Applicant: 厦门大学

Inventor： 石松林 ,  魏永贵 ,  冯娴 ,  余杨

IPC: C12N5/071 ,  G01N15/14

Abstract: 本发明公开了一种用于检测组织生理状态ROS水平的肝星状细胞分离与标记方法，包括如下步骤：新鲜肝组织碎片化，酶液消化组织及ROS探针DCFH‑DA的同步标记；酶解液过70μm细胞筛；Nycodenz梯度离心，获取肝星状细胞；流式细胞术检测肝星状细胞ROS水平。本发明能够直接对肝组织中肝星状细胞和肝细胞的ROS水平进行标记，检测结果反映的是肝细胞和肝星状细胞在真实的体内生理状态下ROS水平，显著提高肝星状细胞提取的效率，大大缩短提取时间，最大程度保留细胞活性和体内的生理状态。

公开(公告)号：CN115896115B

公开(公告)日：2024-09-20

申请号：CN202211301518.X

申请日：2022-10-24

Applicant: 厦门大学

Inventor： 石松林 ,  朱新乐 ,  冯娴 ,  刘宽灿 ,  杨玲

IPC: C12N15/115 ,  C07K14/00 ,  C12N15/85 ,  C07K7/06 ,  G01N33/68 ,  G01N33/58 ,  A61K38/16 ,  A61K38/08 ,  A61P1/16 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了靶向NPM蛋白的肽适配子及其多肽药物和应用。本发明公开了四个靶向结合NPM蛋白的肽适配子序列，亲和性高、特异性强，动物实验显示其具有抗肿瘤生长、抑制肝纤维化等功能。因此，本发明极具应用价值。本发明通过双分子荧光互补技术，从高通量文库中筛选获得了靶向结合NPM蛋白的候选肽适配子；利用免疫共沉淀技术，确定了能靶向结合NPM蛋白的特异肽适配子；利用靶向结合NPM蛋白的肽适配子序列，体外合成了能透膜进入细胞的小分子多肽药物sp10和sp177；利用肝癌细胞的皮下移植瘤技术，确证了sp10具有抗肿瘤生长的作用；利用肝星状细胞模型和肝纤维化小鼠模型，证实了sp177具有抑制肝星状细胞迁移能力、抑制小鼠肝纤维化进展的作用。