基于CRISPR-Cas12a的多重真菌毒素靶标检测方法

    公开(公告)号:CN119614680A

    公开(公告)日:2025-03-14

    申请号:CN202411805487.0

    申请日:2024-12-10

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明提供一种基于CRISPR‑Cas12a的多重真菌毒素靶标检测方法,在不更换Cas12a和crRNA的情况下,利用CRISPR/Cas12a辅助的横向流动分析平台成功实现了OTA和AFB1的多重检测,降低了实验成本。与商业化的胶体金试纸条相比,检测灵敏度提高了1到2个数量级。在无需复杂磁分离步骤下,可直接实现Signal‑on信号模式,减少了复杂实验操作。本研究展示了MC‑LFA策略在资源有限环境中进行食品安全检测的潜力,仅替换适配体序列可以有效地扩大检测靶点范围,使其成为适用于各种分析方案的通用技术,在公共卫生、农业和环境监测等多个领域具备潜在的应用前景。

    一种ctDNA检测试剂盒及检测方法
    3.
    发明公开

    公开(公告)号:CN117844912A

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202410036530.5

    申请日:2024-01-10

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,公开了一种ctDNA检测试剂盒及检测方法。试剂盒包括:用于目标ctDNA进行扩增的试剂,包括第一阶段扩增试剂和第二阶段扩增试剂;信号标记物TPA‑DCPPNPs;保护探针,用于猝灭TPA‑DCPP NPs的ECL信号;硫代捕获探针,用于捕获所述保护探针。检测方法为:将靶标两级扩增后,得到PER产物;制备双链捕获probe@protector探针;将信号标记物TPA‑DCPPNPs滴涂在玻碳电极上,然后修饰AuNPs,再修饰双链捕获probe@protector探针,封闭非特异性活性位点,然后与得到的PER产物共孵育,然后测定ECL信号。本发明检测方法线性检测范围宽且具有较低的检测限。

    一种同时检测H2O2和NADH的荧光探针及其制备方法

    公开(公告)号:CN117756829A

    公开(公告)日:2024-03-26

    申请号:CN202311686951.4

    申请日:2023-12-11

    Abstract: 本发明公开了一种同时检测过氧化氢(H2O2)和还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的荧光探针(AC‑NH)及其制备方法。制备得到的半花菁染料外观呈黄绿色固体,可用于生物体内外的H2O2和NADH的检测。所述探针的设计策略主要是基于探针与H2O2以及NADH之间的氧化还原反应,同时改变探针的荧光强度或波长。本发明制备得到的H2O2和NADH检测探针,可以快速的检测受检测物的浓度,具有光稳定性好、荧光量子产率高、特异性强、灵敏度高、细胞毒性低、有利于细胞和生物体成像分析等优点,为荧光成像等领域提供了良好的应用前景。

    一种快速检测NADH的荧光探针及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116283905A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202211103321.5

    申请日:2022-09-09

    Applicant: 南通大学

    Inventor: 王琦 杨超杰 吴丽

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测NADH(还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的荧光探针及其制备方法和应用。制备得到的半花菁染料外观呈棕红色固体,可用于生物体内外的NADH的检测。所述探针的设计策略主要是基于NADH与探针之间的氧化还原反应,同时改变探针的荧光强度或波长。本发明制备得到的NADH检测探针,可以快速的检测受检测物的浓度,具有水溶性好、光稳定性好、荧光量子产率高、特异性强、灵敏度高、细胞毒性低、有利于细胞和生物体成像分析等优点,为荧光成像等领域提供了良好的应用前景。

    一种比率式聚集诱导ECL/EC传感平台、其制备方法及其检测循环肿瘤DNA的应用

    公开(公告)号:CN115901882A

    公开(公告)日:2023-04-04

    申请号:CN202211398628.2

    申请日:2022-11-09

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明公开了一种比率式聚集诱导ECL/EC传感平台、其制备方法及其检测循环肿瘤DNA的应用。该传感平台是以纳米沉淀法制备的TPA‑BT纳米粒子(TPA‑BT NPs)为ECL发光体,滴加到处理过的金电极表面孵育后,滴加H1、MCH孵育,滴加核酸外切酶III(Exo III)辅助的靶标循环反应液,孵育后测量ECL与EC的信号比值。检测时,基于二茂铁(ferrocene,Fc)的EC信号及TPA‑BT NPs的ECL信号检测,随着靶标ctDNA浓度的增加,ECL信号逐渐增大,而EC信号逐渐降低,将ECL与EC信号进行比值,在100 aM‑100 pM范围内线性相关。可用于检测ctDNA,具有灵敏度高的特点。

    一种基于荧光激活细胞分选技术的全血循环肿瘤细胞级联分选的装置及方法

    公开(公告)号:CN113188980B

    公开(公告)日:2022-09-16

    申请号:CN202110466035.4

    申请日:2021-04-28

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于荧光激活细胞分选技术的全血循环肿瘤细胞级联分选的装置,包括初级分选管线及若干个次级分选管线;所述初级分选管线包括全血进样口、细胞分选区以及废液出样口;所述次级分选管线包括稀释液进样口、细胞分选区、细胞稀释区、CTCs出样口以及废液出样口;所述细胞分选区包括荧光检测区和压力控制系统;本发明操作简便,只需要将一定体积的全血注入全血进样口,配合稀释液的进样、荧光检测装置、分选装置以及注射泵等,便可在一段时间后去除血样中的红细胞、白细胞和血小板等非特异性细胞,最终获得高纯度的循环肿瘤细胞。

    用于单细胞固定并原位进行医学分析的微流控芯片装置及其应用

    公开(公告)号:CN111019805A

    公开(公告)日:2020-04-17

    申请号:CN201911326487.1

    申请日:2019-12-20

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明提供一种用于单细胞固定并原位进行医学分析的微流控芯片及其应用,包括细胞阵列,所述细胞阵列是由若干个重复微阵列单元构成的矩阵结构,微阵列单元包括单元入口、细胞捕捉卡口、核酸扩增反应室和单元出口,核酸扩增反应室由若干个栅栏围绕而成,栅栏之间存在间隙,所述间隙只能通过细胞液、细胞分散液或核酸扩增试剂,不能通过油相;栅栏外围为导流油相的导流渠道,导流渠道分别与单元入口和单元出口连通。本发明利用该芯片构建单细胞分析平台,实现对高、低通量的单细胞的快速分选隔离,提供对细胞捕获的直观视觉认证,并能够控制单细胞核酸扩增反应的试剂体积、便利进行下游基因分析,来解决现有单细胞技术中的成本高、分析复杂的问题。

    用于单细胞固定-隔离并原位核酸扩增的微流控芯片及其应用

    公开(公告)号:CN110982882A

    公开(公告)日:2020-04-10

    申请号:CN201911328152.3

    申请日:2019-12-20

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明提供一种用于单细胞固定-隔离并原位核酸扩增的微流控芯片及其应用,包括进样口、细胞阵列室和出样口,所述细胞阵列室包括若干个细胞阵列室单元,所述细胞阵列室单元包括单元进口、单元出口、核酸扩增反应室和导流管道,所述核酸扩增反应室的入口为细胞固定卡口;所述导流管道的两端分别连通细胞固定卡口与单元进口之间的通道,以及核酸扩增反应室出口与单元出口之间的通道。本发明能实现细胞的快速固定。待细胞固定后,通过油水不互溶形成油包水隔离单元,每个单元只含有一个细胞和用于细胞裂解和核酸扩增的试剂,从而实现单细胞的基因等信息的分析。可以解决现有技术中无法做到的集单细胞固定和原位分析于一体的问题。

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