公开(公告)号：CN117660692A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311449303.7

申请日：2023-11-02

Applicant: 南昌大学

Inventor： 黄小林 ,  熊勇华 ,  郭宇乾 ,  李响敏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于核酸检测领域，具体涉及一种基于AIEgens荧光探针的CRISPR核酸诊断方法。该诊断方法提供一种用于核酸检测的CRISPR试剂盒，该诊断方法包括以下步骤：提供CRISPR‑AIEgens信号体系、RPA和/或RT‑RPA；将待检测核酸样本加入到RPA、RT‑RPA中的任意一种反应液内进行扩增反应，得到RPA和/或RT‑RPA反应液，扩增反应结束后使CRISPR反应液与RPA和/或RT‑RPA反应液混合均匀，得到反应混合液；对所述反应混合液进行荧光信号检测。本发明提供的CRISPR核酸诊断方法构建了一对多且无标记型AIEgens荧光探针，AIEgens荧光探针信噪比高，具有更高的检测灵敏度；此外球形核酸AIEgens荧光探针在负载生物样本中展现出极佳的抗基质能力，因此该方法能够实现对目标物的恒温扩增和CRISPR的一体化现场诊断。