一种人源性肺纤维化芯片模型的构建方法

    公开(公告)号:CN116515733A

    公开(公告)日:2023-08-01

    申请号:CN202310578001.3

    申请日:2023-05-19

    Abstract: 本申请提供一种人源性肺纤维化芯片模型的构建方法,其包括以下步骤:(1)构建肺芯片;(2)确认细胞生长状况,在芯片中输入含有转化生长因子的促细胞纤维化培养基以诱导细胞纤维化;(3)动态灌注所述转化生长因子预设时间后,获得人源性肺纤维化芯片模型。本申请利用人源性细胞系,实现芯片内细胞外基质及多种细胞的定向培养,同时整合微流体及气液界面,高保真模拟肺局部微环境,高度还原肺局部微环境对肺纤维化的发生发展产生的作用,充分表征肺纤维化疾病的特征,有效缩短时间成本和经济成本。

    重组表达载体系统及其在构建干细胞定向诱导报告细胞中的应用

    公开(公告)号:CN114592004A

    公开(公告)日:2022-06-07

    申请号:CN202210351826.7

    申请日:2022-04-02

    Abstract: 本申请公开一种重组表达载体系统,包括:目的基因的启动子、编码蛋白酶的第一基因元件、编码转录因子DNA结合结构域‑第一分子接头融合蛋白的第二基因元件、编码第二分子接头‑转录因子转录活化结构域‑蛋白酶裂解位点‑降解决定子融合蛋白的第三基因元件和报告基因;所述目的基因的启动子分别驱动所述第一基因元件、所述第二基因元件和所述第三基因元件表达,表达产物构成驱动所述报告基因表达的转录活化效应物。本申请应用于干细胞定向诱导分化的监控中,通过限定不同的目的基因及对应的目的基因的启动子,能够实现对不同定向分化方向的监控,监控方法通用性高、可扩展性强。

    一种肝细胞的体外三维培养方法

    公开(公告)号:CN106554937A

    公开(公告)日:2017-04-05

    申请号:CN201610951267.8

    申请日:2016-10-26

    Abstract: 本发明公开一种细胞聚球培养基质,其包括培养区和连接在所述培养区外周的围挡;所述培养区设有若干下半部分为球缺形腔体的聚球孔。还公开一种基质模具,包括相互嵌套以形成细胞聚球培养基质灌注成型腔的板状的第一模板和第二模板;所述第一模板内设有凸台和邻近所述凸台周向设置的凹槽,所述凸台表面设有若干上半部分为球缺体的凸点;所述第二模板开设有与所述凹槽外侧槽壁的外轮廓配合的通孔。还公开一种利用所述细胞聚球培养基质进行动物细胞体外三维聚球培养的方法。本发明肝细胞的体外三维培养方法成本较低、规模可控、工序简单,培养效果大大优于二维平板培养。

    人脐带间充质干细胞来源的永生化细胞的构建方法及所使用的重组载体

    公开(公告)号:CN116286994A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310229338.3

    申请日:2023-03-09

    Abstract: 本申请公开一种用于构建人脐带间充质干细胞来源的永生化细胞的重组载体,所述重组载体为在酶切位点之间插入编码人端粒酶的催化亚基基因片段的GV367载体。还提供一种人脐带间充质干细胞来源的永生化细胞的构建方法:构建含有人端粒酶的催化亚基基因片段的重组载体;将所述重组载体通过慢病毒体系导入人脐带间充质干细胞中;通过选择性培养条件筛选出永生化细胞;其中,所述重组载体采用如前所述的重组载体。该细胞系在体外传代50代以上,仍有较好的活力,保持良好的干性和较强的增殖能力,保留与原代UCMSC相似的主要的形态学和生理学特征,是一种永生化的细胞系。通过验证,表明该细胞系无致瘤倾向、无急性毒性。

    一种肝细胞的体外三维培养方法

    公开(公告)号:CN106554937B

    公开(公告)日:2019-08-27

    申请号:CN201610951267.8

    申请日:2016-10-26

    Abstract: 本发明公开一种细胞聚球培养基质,其包括培养区和连接在所述培养区外周的围挡;所述培养区设有若干下半部分为球缺形腔体的聚球孔。还公开一种基质模具,包括相互嵌套以形成细胞聚球培养基质灌注成型腔的板状的第一模板和第二模板;所述第一模板内设有凸台和邻近所述凸台周向设置的凹槽,所述凸台表面设有若干上半部分为球缺体的凸点;所述第二模板开设有与所述凹槽外侧槽壁的外轮廓配合的通孔。还公开一种利用所述细胞聚球培养基质进行动物细胞体外三维聚球培养的方法。本发明肝细胞的体外三维培养方法成本较低、规模可控、工序简单,培养效果大大优于二维平板培养。

    浓度梯度微流控芯片及其应用

    公开(公告)号:CN115651839B

    公开(公告)日:2024-09-10

    申请号:CN202211371522.3

    申请日:2022-11-03

    Abstract: 本申请提供一种浓度梯度微流控芯片及其应用,其中,所述浓度梯度微流控芯片包括顶层芯板、中间芯板及底层芯板,中间芯板与底层芯板之间形成有三维细胞微球培养空间及药物流动通道,三维细胞微球培养空间及药物流动通道之间连通,顶层芯板设有微球注入孔及药物注入孔,微球注入孔与所述三维细胞微球培养空间连通,药物注入孔与所述药物流动通道连通;所述药物流动通道包括分流通道、环形流道及药物流出道。本申请将三维细胞微球培养和药物筛选集成于一体,构建了类体内的动态微环境,能够保留三维细胞结构,更好地模拟体内细胞行为功能,提高药物敏感以进行药物筛选,使得所得药筛结果更为准确可靠。

    干细胞生理状态切换的调控方法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116891872A

    公开(公告)日:2023-10-17

    申请号:CN202310775950.0

    申请日:2023-06-28

    Abstract: 本申请公开一种干细胞生理状态切换的调控方法:构建含有目的基因1和目的基因2的条件性基因切换表达载体体系;将所述条件性基因切换表达载体体系导入所述干细胞中;施加诱导条件触发所述目的基因1表达、目的基因2不表达;撤除所述诱导条件触发所述目的基因1不表达、目的基因2表达;所述目的基因1包括永生化相关的基因,所述目的基因2包括功能性基因;所述条件性基因切换表达载体体系包括六个基因元件。本申请应用于干细胞永生化和加强免疫调节功能的切换,解决来源的有限性和差异性,应用价值高,实用性强。

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