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公开(公告)号:CN111575290B
公开(公告)日:2022-05-24
申请号:CN202010477835.1
申请日:2020-05-29
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种苏云金芽胞杆菌营养期强启动子Prsi及其应用。本发明发现了一个在苏云金芽胞杆菌营养期工作的强启动子Prsi,具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,其核心位点如图1所示。本发明发现的启动子为组成型强启动子,该启动子在苏云金芽胞杆菌中表达β‑半乳糖苷酶的活性是芽胞杆菌强启动子Phj3(SEQ ID NO:2所示核苷酸序列)的5倍。该启动子可以在大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌等细菌中用于构建高效表达外源蛋白。本发明还涉及基因操作所需的质粒载体,利用该启动子构建基因工程菌株的方法及相应的菌株等。
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公开(公告)号:CN1593155A
公开(公告)日:2005-03-16
申请号:CN200310107115.2
申请日:2003-11-27
Applicant: 南开大学 , 天津市园艺工程研究所 , 天津市农业生物技术研究中心
Abstract: 本发明涉及的是一种烟雾剂其制备方法,特别是涉及苏云金芽孢杆菌科莫尔亚种(Bt15A3)的烟雾剂及其制备方法。简称Bt15A3烟雾剂,亦称热雾剂,“Bt15A3,是一种特异性微生物杀虫剂,主要特点是:通过其毒蛋白及芽孢杀灭虫害。中国有几个厂家生产Bt原粉和可湿性粉剂,但不能喷烟雾。本发明是提供一种Bt15A3烟雾剂及其制备方法。将Bt15A3原粉借助多种表面活性剂通过极超微粉碎的方法分散悬浮于高沸点稀释剂中制成。在使用时用烟雾机喷射出极细的雾粒(2-5μm占80%以上),在漂移过程中一旦接触作物就可牢牢地沉积于作物叶子和茎上,用于防治作物虫害。本发明具有药效高、成本低、节约大量淡水,以及对环境和操作人员污染毒害小的特点。
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公开(公告)号:CN100595272C
公开(公告)日:2010-03-24
申请号:CN200810052439.3
申请日:2008-03-14
Applicant: 南开大学
Abstract: 一株杀虫、抑真菌的苏云金芽孢杆菌菌株及其应用。本发明菌株为苏云金芽孢杆菌Bacillusthuringiensis 519-1,简称Bt 519-1,保藏号CGMCC No.2327,该菌株携带有杀虫蛋白编码基因cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1I、cry2及其vip3A以及70kDa几丁质酶编码基因chiB。所述菌株的孢晶复合物冻干粉对甜菜夜蛾的半致死浓度(LC50)仅为8.8ug/mL,能抑制8种常见植物病源真菌菌丝的生长,可100%抑制真菌孢子萌发。利用这一菌株可生产杀虫抗病的多功能生物农药,用于防治鳞翅目重大害虫甜菜夜蛾和棉铃虫,同时对植物病源真菌也有抑制作用。
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公开(公告)号:CN111575290A
公开(公告)日:2020-08-25
申请号:CN202010477835.1
申请日:2020-05-29
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种苏云金芽胞杆菌营养期强启动子Prsi及其应用。本发明发现了一个在苏云金芽胞杆菌营养期工作的强启动子Prsi,具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,其核心位点如图1所示。本发明发现的启动子为组成型强启动子,该启动子在苏云金芽胞杆菌中表达β-半乳糖苷酶的活性是芽胞杆菌强启动子Phj3(SEQ ID NO:2所示核苷酸序列)的5倍。该启动子可以在大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌等细菌中用于构建高效表达外源蛋白。本发明还涉及基因操作所需的质粒载体,利用该启动子构建基因工程菌株的方法及相应的菌株等。
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公开(公告)号:CN102899347B
公开(公告)日:2014-04-09
申请号:CN201210446953.1
申请日:2012-11-09
Applicant: 南开大学
Abstract: 通过敲除(yvoA)基因构建高产几丁质酶苏云金芽胞杆菌的方法属于生物工程技术领域。本方法首先以苏云金芽胞杆菌ATCC35646为出发菌株,以温度敏感型载体pKSV7为骨架构建一个基因敲除载体pKSV-ued,利用同源重组原理,通过双交换过程敲除苏云金芽胞杆菌ATCC35646菌株基因组yvoA基因的方法,构建了一个高产几丁质酶菌株CJ212。经过几丁质酶活测定,确定改良菌株产几丁质酶的能力大大提高。
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公开(公告)号:CN102978209A
公开(公告)日:2013-03-20
申请号:CN201210408862.9
申请日:2012-10-24
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用。本发明首先提供了一种DNA定向分子育种方法,经所述的方法进行DNA操作后获得的缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子序列——chiBp△135,如序列表SEQ ID No.1所示。所述的启动子序列,可以使与其相连接的目的基因的核苷酸序列以组成型方式表达。可以利用这一突变的启动子在苏云金芽胞杆菌或大肠杆菌细胞中组成型、大量表达目的蛋白。
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公开(公告)号:CN102899347A
公开(公告)日:2013-01-30
申请号:CN201210446953.1
申请日:2012-11-09
Applicant: 南开大学
Abstract: 通过敲除(yvoA)基因构建高产几丁质酶苏云金芽胞杆菌的方法属于生物工程技术领域。本方法首先以苏云金芽胞杆菌ATCC35646为出发菌株,以温度敏感型载体pKSV7为骨架构建一个基因敲除载体pKSV-ued,利用同源重组原理,通过双交换过程敲除苏云金芽胞杆菌ATCC35646菌株基因组yvoA基因的方法,构建了一个高产几丁质酶菌株CJ212。经过几丁质酶活测定,确定改良菌株产几丁质酶的能力大大提高。
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公开(公告)号:CN107098953A
公开(公告)日:2017-08-29
申请号:CN201710265395.1
申请日:2017-04-21
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及一种几丁质结合蛋白Bt‑CBP及其编码基因和制备方法与应用,属于基因工程技术领域。本发明首次从一株苏云金芽胞杆菌中克隆出几丁质结合蛋白的编码基因,通过构建原核表达载体,在大肠杆菌中表达了该基因,获得了具有高活性的表达产物。该几丁质结合蛋白Bt‑CBP本身对黄瓜灰霉病菌、尖孢镰刀菌等具有良好的抑制效果。此外,该几丁质结合蛋白Bt‑CBP对几丁质ChiB的催化活性有增效作用,可以促进ChiB高效降解几丁质,并能显著增强ChiB对黄瓜灰霉的抑制效果,具有良好的生物防治功能,为农业领域、抗真菌药物研发的提供新的研究方向,具有广阔应用价值,将产生巨大工业效益和经济价值。
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公开(公告)号:CN102978209B
公开(公告)日:2013-12-18
申请号:CN201210408862.9
申请日:2012-10-24
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用。本发明首先提供了一种DNA定向分子育种方法,经所述的方法进行DNA操作后获得的缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子序列——chiBp△135,如序列表SEQIDNo.1所示。所述的启动子序列,可以使与其相连接的目的基因的核苷酸序列以组成型方式表达。可以利用这一突变的启动子在苏云金芽胞杆菌或大肠杆菌细胞中组成型、大量表达目的蛋白。
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公开(公告)号:CN101245329A
公开(公告)日:2008-08-20
申请号:CN200810052439.3
申请日:2008-03-14
Applicant: 南开大学
Abstract: 一株杀虫、抑真菌的苏云金芽孢杆菌菌株及其应用。本发明菌株为苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis 519-1,简称Bt 519-1,保藏号CGMCC No.2327,该菌株携带有杀虫蛋白编码基因cry1Aa,、cry1Ab、cry1Ac、cry1I、cry2及其vip3A以及70kDa几丁质酶编码基因chiB。所述菌株的孢晶复合物冻干粉对甜菜夜蛾的半致死浓度(LC50)仅为8.8μg/mL,能抑制8种常见植物病源真菌菌丝的生长,可100%抑制真菌孢子萌发。利用这一菌株可生产杀虫抗病的多功能生物农药,用于防治鳞翅目重大害虫甜菜夜蛾和棉铃虫,同时对植物病源真菌也有抑制作用。
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