公开(公告)号：CN103382482A

公开(公告)日：2013-11-06

申请号：CN201210132963.8

申请日：2012-05-03

Applicant: 南开大学

Inventor： 李明刚 ,  李宠 ,  乔坤艳 ,  张耀方 ,  马百成 ,  马志华 ,  马超 ,  董震 ,  郝军凤 ,  姬艳丽

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N1/13 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明描述了一种食用安全性整合型螺旋藻高效表达载体p21GZ-GAG的构建方法及应用技术。该载体含有GFP标签、螺旋藻特异性启动子和10拷贝促胰岛素GLP-1基因。通过去除自杀质粒pSZ21中Tn5转座单元的抗生素基因构建载体p21GZ；分别克隆GFP、螺旋藻特异启动子AP以及10拷贝促胰岛素GLP-1基因，并串联连接成表达单元GAG，将其插入p21GZ获得p21GZ-GAG。该载体保留了其自杀型质粒和Tn5介导的转座整合能力，可将表达单元GAG整合进螺旋藻基因组，通过螺旋藻特异启动子AP启动GLP-1的表达；剔除抗性标记而通过GFP进行筛选，保证其食用安全性，可研发防治糖尿病的保健品。

公开(公告)号：CN104178496A

公开(公告)日：2014-12-03

申请号：CN201310200002.0

申请日：2013-05-27

Applicant: 南开大学

Inventor： 李明刚 ,  郝军凤 ,  乔坤艳 ,  马超 ,  马百成 ,  王宇 ,  李宠 ,  张耀方 ,  马志华 ,  姬艳丽 ,  董震 ,  屠培培 ,  李晓丹

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/52 ,  C12N15/63 ,  C12N15/74 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明描述了一种植物低磷应答调控单元PSS(PHR1-35S-SIZ1)表达载体pX6-PHR1-35S-SIZ1的构建技术。该表达载体的构建方法是，从拟南芥中克隆得到SIZ1基因，将35S启动子插入到SIZ1基因的上游，构建35S-SIZ1表达单元，将该表达单元插入植物表达载体pX6，构建载体pX6-35S-SIZ1，再将PHR1基因插入该载体中，得到表达载体pX6-PHR1-35S-SIZ1。用表达载体pX6-PHR1-35S-SIZ1转化农杆菌GV3101，得到同时含有PHR1基因和SIZ1基因的工程农杆菌菌株NK-314。