公开(公告)号：CN108753772A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810298998.6

申请日：2018-04-04

Applicant: 南华大学

Inventor： 龙鼎新 ,  朱家佳 ,  李小玲 ,  杨越 ,  唐乖

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/90 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

CPC classification number: C12N15/113 ,  C12N5/0693 ,  C12N9/22 ,  C12N9/6472 ,  C12N15/85 ,  C12N15/907 ,  C12N2310/10 ,  C12N2510/00 ,  C12Y304/22052

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及基于CRISPR/Cas技术敲除CAPNS1基因的人神经母细胞瘤细胞系的构建方法。本发明提供了敲除人神经母细胞瘤细胞CAPNS1基因的方法，质粒转染SK‑N‑SH细胞后，制备单克隆，CruiserTM Enzyme酶切后疑似为阳性克隆，单克隆测序结果显示SK‑N‑SH细胞CAPNS1基因敲除细胞系构建成功；并且，在CAPNS1‑/‑组，CAPNS1蛋白及Calpain1和Calpain2蛋白水平明显降低。结果表明SK‑N‑SH细胞CAPNS1基因敲除细胞系构建成功。

公开(公告)号：CN108753772B

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN201810298998.6

申请日：2018-04-04

Applicant: 南华大学

Inventor： 龙鼎新 ,  朱家佳 ,  李小玲 ,  杨越 ,  唐乖

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/90 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及基于CRISPR/Cas技术敲除CAPNS1基因的人神经母细胞瘤细胞系的构建方法。本发明提供了敲除人神经母细胞瘤细胞CAPNS1基因的方法，质粒转染SK‑N‑SH细胞后，制备单克隆，CruiserTM Enzyme酶切后疑似为阳性克隆，单克隆测序结果显示SK‑N‑SH细胞CAPNS1基因敲除细胞系构建成功；并且，在CAPNS1‑/‑组，CAPNS1蛋白及Calpain1和Calpain2蛋白水平明显降低。结果表明SK‑N‑SH细胞CAPNS1基因敲除细胞系构建成功。