公开(公告)号：CN115896047B

公开(公告)日：2023-06-16

申请号：CN202211589538.1

申请日：2022-12-12

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 冯速 ,  曹林 ,  贡怡 ,  郑芳园 ,  唐伟 ,  郁云兰 ,  吴静 ,  陈晓洋 ,  李雪 ,  魏恒

IPC: C12N9/00 ,  C07K19/00 ,  C12N15/52 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C40B50/06 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供重组T4DNA连接酶突变体、融合蛋白及其应用，突变体在野生型T4DL(SEQ ID NO:1)上，进行了K16R、I121R、V125K、K226A、F235A、D371G、D373R、K470D等多个点突变；融合蛋白在突变体的一端或两端包含核酸结合结构域，核酸结合结构域与T4DNA连接酶突变体之间使用多肽桥连接。本发明的突变体及融合蛋白具有高活性、高效率。利用本发明的突变体及融合蛋白进行NGS建库，显示出对低起始投入量的良好兼容，文库产量显著提高，适用于临床样本的NGS检测。

公开(公告)号：CN111647576B

公开(公告)日：2021-02-09

申请号：CN202010589979.6

申请日：2020-06-24

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 冯速 ,  贡怡 ,  徐晓昱 ,  唐伟 ,  张晓薇 ,  刘传军 ,  曹林 ,  张力军 ,  聂俊伟 ,  瞿志鹏

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种热稳定性逆转录酶突变体及其应用，所述MMLV逆转录酶突变体是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列中插入、取代、或缺失1个或多个氨基酸，或者在SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的一个或两个末端添加或删除1个或多个氨基酸，与SEQ ID NO.2具有80％同一性且具MMLV逆转录酶功能和热稳定性增强的蛋白。本发明所述的突变体，活性与母本相当，但热稳定性有显著提高，耐热能力可达到65℃，60℃下反应的活力可以是37℃的1.5倍；在50℃下保温5h，残余活力超过60％，热稳定性比相应母本提高至少4倍。

公开(公告)号：CN111647576A

公开(公告)日：2020-09-11

申请号：CN202010589979.6

申请日：2020-06-24

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 冯速 ,  贡怡 ,  徐晓昱 ,  唐伟 ,  张晓薇 ,  刘传军 ,  曹林 ,  张力军 ,  聂俊伟 ,  瞿志鹏

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种热稳定性逆转录酶突变体及其应用，所述MMLV逆转录酶突变体是在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列中插入、取代、或缺失1个或多个氨基酸，或者在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的一个或两个末端添加或删除1个或多个氨基酸，与SEQ ID NO.1具有80％同一性且具MMLV逆转录酶功能和热稳定性增强的蛋白。本发明所述的突变体，活性与母本相当，但热稳定性有显著提高，耐热能力可达到65℃，60℃下反应的活力可以是37℃的1.5倍；在50℃下保温5h，残余活力超过60％，热稳定性比相应母本提高至少4倍。

公开(公告)号：CN115896047A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211589538.1

申请日：2022-12-12

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 冯速 ,  曹林 ,  贡怡 ,  郑芳园 ,  唐伟 ,  郁云兰 ,  吴静 ,  陈晓洋 ,  李雪 ,  魏恒

IPC: C12N9/00 ,  C07K19/00 ,  C12N15/52 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C40B50/06 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供重组T4DNA连接酶突变体、融合蛋白及其应用，突变体在野生型T4DL(SEQ ID NO:1)上，进行了K16R、I121R、V125K、K226A、F235A、D371G、D373R、K470D等多个点突变；融合蛋白在突变体的一端或两端包含核酸结合结构域，核酸结合结构域与T4DNA连接酶突变体之间使用多肽桥连接。本发明的突变体及融合蛋白具有高活性、高效率。利用本发明的突变体及融合蛋白进行NGS建库，显示出对低起始投入量的良好兼容，文库产量显著提高，适用于临床样本的NGS检测。

公开(公告)号：CN110684752B

公开(公告)日：2020-09-29

申请号：CN201910949628.9

申请日：2019-10-08

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 贡怡 ,  冯速 ,  徐晓昱 ,  刘来花 ,  曹林 ,  张力军 ,  聂俊伟 ,  瞿志鹏

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/686 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种耐受性提高的突变型Taq DNA聚合酶及其制备方法和应用，本发明所述的一种突变型Taq DNA聚合酶，其是对如SEQ ID NO.1所示的Taq DNA聚合酶的氨基酸序列中插入、取代、或缺失1个或多个氨基酸，且与SEQ ID NO.1所示的Taq DNA聚合酶相比，其杂质耐受性显著增强的氨基酸序列。本发明的重组型Taq DNA聚合酶突变体对血液、荧光染料及高离子强度的耐受性明显增强，能够直接进行血液样品的PCR反应检测，节约时间，避免假阴性。