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公开(公告)号:CN112300972B
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN201910710843.3
申请日:2019-08-02
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种以木质素为原料生产粘糠酸的基因工程菌。所述的基因工程菌为将红球菌中的粘糠酸环化异构酶、邻苯二酚2,3双加氧酶基因和原儿茶酸3,4双加氧酶基因三基因敲除,并插入原儿茶酸脱羧酶基因和原儿茶酸脱羧酶辅酶基因的基因工程菌。本发明通过将微生物中粘糠酸降解途径敲除使菌株能够利用木质素生产粘糠酸,随后敲除粘糠酸前体物质—邻苯二酚的代谢支路途径使得更多的代谢流流向粘糠酸,并敲除菌株的原儿茶酸降解途径以阻断原儿茶酸的代谢途径,最后导入外源原儿茶酸脱羧酶基因和异戊二烯化辅因子酶基因连接原儿茶酸到邻苯二酚的代谢路径以扩大菌株的底物谱。本发明的基因工程菌可以利用木质素生产粘糠酸,实现木质素的高值化利用。
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公开(公告)号:CN112300973B
公开(公告)日:2022-06-24
申请号:CN201910710969.0
申请日:2019-08-02
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种以苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体为反向筛选标记的红球菌基因编辑方法。所述方法通过将红球菌中苯丙氨酰‑tRNA合成酶α‑亚基关键位点的丙氨酸位点突变为甘氨酸形成苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体,苯丙氨酰‑tRNA合成酶突变体合成的tRNA可以将对氯苯丙氨酸组装进蛋白质,从而使蛋白质失去活性,导致菌体死亡,达到筛选的目的。以苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体作为红球菌基因编辑中的反向筛选标记可实现对编辑成功的菌株进行高效筛选。
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公开(公告)号:CN112538451A
公开(公告)日:2021-03-23
申请号:CN201910898097.5
申请日:2019-09-23
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一株过表达ATF基因的生产乙酸丁酯的拜氏梭菌。本发明以高效生产丁醇和乙酰‑CoA的拜氏梭菌作为宿主,引入醇酰基转移酶基因,获得过表达ATF基因的拜氏梭菌基因工程菌。本发明的基因工程菌株可在72h内生产1.5g/L乙酸丁酯,通过在发酵培养基中添加10%十二烷和1%碳酸钙,可进一步提高乙酸丁酯的产量至5.5g/L,拜氏梭菌适用于工业化发酵生产乙酸丁酯。
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公开(公告)号:CN112300973A
公开(公告)日:2021-02-02
申请号:CN201910710969.0
申请日:2019-08-02
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种以苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体为反向筛选标记的红球菌基因编辑方法。所述方法通过将红球菌中苯丙氨酰‑tRNA合成酶α‑亚基关键位点的丙氨酸位点突变为甘氨酸形成苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体,苯丙氨酰‑tRNA合成酶突变体合成的tRNA可以将对氯苯丙氨酸组装进蛋白质,从而使蛋白质失去活性,导致菌体死亡,达到筛选的目的。以苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体作为红球菌基因编辑中的反向筛选标记可实现对编辑成功的菌株进行高效筛选。
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公开(公告)号:CN111303491A
公开(公告)日:2020-06-19
申请号:CN201811428473.6
申请日:2018-11-27
Applicant: 南京理工大学
IPC: C08L1/02 , C08L79/04 , C12N11/12 , C12N11/089
Abstract: 本发明公开了一种细菌纤维素/聚合多巴胺复合纳米材料的制备方法。所述方法采用聚合多巴胺对细菌纤维素进行修饰得到细菌纤维素/聚合多巴胺复合纳米材料。本发明方法在室温下即可实现,无需添加有毒易挥发的有机溶剂,方法简单,操作容易,适于大规模生产以及应用。本发明制得的复合纳米材料能够作为载体在无需活化的条件下对酶进行固定,具有固定化效率高、酶固定量大、活性回收率及稳定性高的特点。
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公开(公告)号:CN120040686A
公开(公告)日:2025-05-27
申请号:CN202510281782.9
申请日:2025-03-11
Applicant: 南京理工大学
IPC: C08F289/00 , C08F220/60 , C12N11/089 , C12N9/42 , C12N9/24
Abstract: 本发明公开一种温敏性木质素基共聚物及其制备方法和在酶固定化中的应用。本方面通过木质素与丙烯酰基甘氨酰胺共聚合成具有UCST特性的温敏性木质素基共聚物,并以此为载体进行酶的固定化。本发明结合了木质素的可再生性与pNAGA的温敏特性,显著提升了固定化酶的催化效率和稳定性,固定化酶热稳定性和pH稳定性显著增强,固定化酶经5次循环后仍保持60%的酶活性,提高了固定化酶的使用寿命,降低了生产成本,适用于工业化生产应用。
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公开(公告)号:CN114891774B
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202210481456.9
申请日:2022-05-05
Applicant: 南京理工大学
IPC: C12N9/92 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12P19/02 , C12P19/24 , C12P7/06 , C12P7/16 , C12P7/6409 , C12P7/64 , C12P17/04 , C12P7/56 , C12P7/46 , C12P7/52 , C12P7/48 , C12P7/44 , C12P7/6436 , C12P13/08 , C12P13/14 , C12P13/22 , C12P13/06 , C12P7/42 , C12P5/02 , C12P7/24 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种在酵母细胞中高活性表达的木糖异构酶,具有ID NO.1~SEQ ID NO.4中任一氨基酸序列,四种木糖异构酶分别来自于Acetanaerobacterium elongatum、Bacterium J10、Hallella seregens、Streptobacillus canis菌株,它们的单独表达或组合表达能够赋予酵母细胞转化木糖为木酮糖的能力,进而赋予宿主细胞将木糖转化为其他产物的能力。本发明还涉及此四种木糖异构酶在酵母利用木糖为底物生产乙醇等化学品上的应用。当该木糖异构酶在酿酒酵母等酵母细胞中被表达时,能够使原来不具备转化木糖为木酮糖能力的宿主获得该转
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公开(公告)号:CN117467562A
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202311052982.4
申请日:2023-08-21
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一株戊糖乳杆菌及其在利用木质纤维素原料产乳酸中的应用。所述的戊糖乳杆菌为戊糖乳杆菌LB‑1,保藏编号为CGMCC No.28055。本发明的戊糖乳杆菌LB‑1除了具备高效乳酸合成能力外,还具备较高的对木糖、阿拉伯糖、半乳糖和甘露糖的利用能力,且对木质纤维素水解液中的较高浓度的抑制物具有耐受能力,能够高效利用木质纤维素原料进行乳酸发酵,利用该菌株发酵DLC预处理后的玉米秸秆水解液,最高可以获得超过200g/L的乳酸浓度。
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公开(公告)号:CN116590352A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310517256.9
申请日:2023-05-09
Applicant: 南京理工大学
IPC: C12P7/10
Abstract: 本发明公开了一种木质纤维素原料、无机盐和酸性试剂一同密化的预处理方法。所述方法将粉碎后的木质纤维素原料、无机盐和酸性试剂加入密化机器中,一同密化成密化生物质,并且密化生物质可直接或进行加热处理后再进行生物转化,生产目标化学品。本发明通过在木质纤维素原料密化过程中添加无机盐和酸性试剂,破坏木质纤维素原有结构,在后续运输、储存过程中可防止原料霉变且实现一定程度的预处理效果,有助于降低进一步预处理的严苛程度。本发明得到的致密木质纤维素原料可获得超过90%的酶促糖化效率,且密化生物质在不水洗不脱毒的条件下可发酵性好。
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公开(公告)号:CN112625932B
公开(公告)日:2022-07-19
申请号:CN202110049160.5
申请日:2021-01-14
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种耐受阿魏酸和香草酸的解脂耶氏酵母工程菌及其构建方法。本发明利用基因工程的方法,构建过量表达YALI0_E25201g、YALI0_B18854g和YALI0_F16731g三个基因中的一种或两种以上的解脂耶氏酵母工程菌,使其对木质纤维素水解液中的阿魏酸和香草酸的耐受性增加,缓解木质纤维素水解液中阿魏酸和香草酸对解脂耶氏酵母利用木质纤维素水解液生产微生物油脂产生的负面影响。与带有对照质粒的对照菌株yl‑XYL+control相比,本发明的解脂耶氏酵母基因工程菌在含有阿魏酸的培养基和含有香草酸的培养基中的生长情况显著改善。
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