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公开(公告)号：CN112300974B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN201910711002.4
申请日：2019-08-02
Applicant: 南京理工大学
IPC: C12N1/21 , C12P7/44 , C02F3/34 , C02F101/34
Abstract: 本发明公开了一种以含酚类化合物为原料生产粘糠酸的基因工程菌。所述的基因工程菌为将红球菌中的粘糠酸环化异构酶基因和邻苯二酚2,3双加氧酶基因双敲除得到的基因工程菌。本发明通过将微生物体内的粘糠酸降解途径进行阻断，使其利用酚类化合物生产附加值较高的粘糠酸，且能够利用多种酚类化合物，如邻苯二酚、苯酚、愈创木酚等，在实现含酚类化合物绿色高效降解的基础上，利用废水生物合成具有高附加值的粘糠酸。
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公开(公告)号：CN112300972A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN201910710843.3
申请日：2019-08-02
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种以木质素为原料生产粘糠酸的基因工程菌。所述的基因工程菌为将红球菌中的粘糠酸环化异构酶、邻苯二酚2,3双加氧酶基因和原儿茶酸3,4双加氧酶基因三基因敲除，并插入原儿茶酸脱羧酶基因和原儿茶酸脱羧酶辅酶基因的基因工程菌。本发明通过将微生物中粘糠酸降解途径敲除使菌株能够利用木质素生产粘糠酸，随后敲除粘糠酸前体物质—邻苯二酚的代谢支路途径使得更多的代谢流流向粘糠酸，并敲除菌株的原儿茶酸降解途径以阻断原儿茶酸的代谢途径，最后导入外源原儿茶酸脱羧酶基因和异戊二烯化辅因子酶基因连接原儿茶酸到邻苯二酚的代谢路径以扩大菌株的底物谱。本发明的基因工程菌可以利用木质素生产粘糠酸，实现木质素的高值化利用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113528586A
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN202010289312.4
申请日：2020-04-14
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种以木质纤维素为原料联合生产乙醇和聚羟基脂肪酸酯的工艺。所述工艺先将木质纤维素原料预处理得到纤维素、半纤维素和木质素，然后将纤维素和半纤维素酶水解，再以酶解液为培养基，接种乙醇发酵菌株生产乙醇，然后直接以预处理后得到的木质素和乙醇发酵产生的含木质素残渣为培养基，或将预处理后得到的木质素和乙醇发酵产生的含木质素残渣经过裂解后得到的裂解液为培养基，接种恶臭假单胞菌Pseudomonas putida NX‑1生产聚羟基脂肪酸酯。本发明将以木质素为原料生产聚羟基脂肪酸酯的工艺和纤维素生产乙醇工艺进行集成，实现木质纤维素三种主要组分的充分利用，同时降低了炼制过程中废弃物的产生，提高整个木质纤维素炼制过程的经济性。
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公开(公告)号：CN112300974A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN201910711002.4
申请日：2019-08-02
Applicant: 南京理工大学
IPC: C12N1/21 , C12P7/44 , C02F3/34 , C02F101/34
Abstract: 本发明公开了一种以含酚类化合物为原料生产粘糠酸的基因工程菌。所述的基因工程菌为将红球菌中的粘糠酸环化异构酶基因和邻苯二酚2,3双加氧酶基因双敲除得到的基因工程菌。本发明通过将微生物体内的粘糠酸降解途径进行阻断，使其利用酚类化合物生产附加值较高的粘糠酸，且能够利用多种酚类化合物，如邻苯二酚、苯酚、愈创木酚等，在实现含酚类化合物绿色高效降解的基础上，利用废水生物合成具有高附加值的粘糠酸。
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公开(公告)号：CN112300972B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN201910710843.3
申请日：2019-08-02
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种以木质素为原料生产粘糠酸的基因工程菌。所述的基因工程菌为将红球菌中的粘糠酸环化异构酶、邻苯二酚2,3双加氧酶基因和原儿茶酸3,4双加氧酶基因三基因敲除，并插入原儿茶酸脱羧酶基因和原儿茶酸脱羧酶辅酶基因的基因工程菌。本发明通过将微生物中粘糠酸降解途径敲除使菌株能够利用木质素生产粘糠酸，随后敲除粘糠酸前体物质—邻苯二酚的代谢支路途径使得更多的代谢流流向粘糠酸，并敲除菌株的原儿茶酸降解途径以阻断原儿茶酸的代谢途径，最后导入外源原儿茶酸脱羧酶基因和异戊二烯化辅因子酶基因连接原儿茶酸到邻苯二酚的代谢路径以扩大菌株的底物谱。本发明的基因工程菌可以利用木质素生产粘糠酸，实现木质素的高值化利用。
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公开(公告)号：CN112300973B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN201910710969.0
申请日：2019-08-02
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种以苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体为反向筛选标记的红球菌基因编辑方法。所述方法通过将红球菌中苯丙氨酰‑tRNA合成酶α‑亚基关键位点的丙氨酸位点突变为甘氨酸形成苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体，苯丙氨酰‑tRNA合成酶突变体合成的tRNA可以将对氯苯丙氨酸组装进蛋白质，从而使蛋白质失去活性，导致菌体死亡，达到筛选的目的。以苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体作为红球菌基因编辑中的反向筛选标记可实现对编辑成功的菌株进行高效筛选。
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公开(公告)号：CN112300973A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN201910710969.0
申请日：2019-08-02
Applicant: 南京理工大学
Abstract: 本发明公开了一种以苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体为反向筛选标记的红球菌基因编辑方法。所述方法通过将红球菌中苯丙氨酰‑tRNA合成酶α‑亚基关键位点的丙氨酸位点突变为甘氨酸形成苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体，苯丙氨酰‑tRNA合成酶突变体合成的tRNA可以将对氯苯丙氨酸组装进蛋白质，从而使蛋白质失去活性，导致菌体死亡，达到筛选的目的。以苯丙氨酰‑tRNA合成酶基因突变体作为红球菌基因编辑中的反向筛选标记可实现对编辑成功的菌株进行高效筛选。
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