振荡型基因表达系统、构建方法及其在鼠李糖脂发酵中的应用

    公开(公告)号:CN113122556A

    公开(公告)日:2021-07-16

    申请号:CN201911391503.5

    申请日:2019-12-30

    Abstract: 本发明公开了一种振荡型基因表达系统、构建方法及其在鼠李糖脂发酵中的应用。所述的振荡型基因表达系统含有启动子PluxI,阻遏基因tetR,启动子Ptet,应答调节因子基因LuxI和LuxR,蛋白降解标签基因ssrA。通过调控基因表达的周期性开关过程,振荡型基因表达系统可以缓解稳定生长期大肠杆菌代谢中间产物及能量的供给压力,使基因表达与底物供给达到平衡,进而提高次级代谢产物的产量。本发明通过在振荡型基因表达调控质粒中导入鼠李糖脂生物合成途径相关基因,实现鼠李糖脂在大肠杆菌中的异源合成,构建得到的高产鼠李糖脂的振荡型基因表达系统的工程菌,发酵产量达838mg/L。

    细菌双杂交纳米抗体筛选系统及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN109929031A

    公开(公告)日:2019-06-25

    申请号:CN201910145037.6

    申请日:2019-02-27

    Abstract: 本发明公开了一种细菌双杂交纳米抗体筛选系统及其构建方法和应用。所述的细菌双杂交纳米抗体筛选系统由含有LexAWT基因元件的pMHA2质粒和含有LexA408基因元件的pMHN2质粒组成。嵌合型双抑制子LexAWT/LexA408可以联同抗原抗体相互作用抑制下游PsulA-cI857基因的表达,间接激活PR-KanR基因的表达,构建严谨高效的纳米抗体阳性筛选系统。候选纳米抗体为合成文库,采用简并引物的方式在CDR3区域引入48个随机碱基并去除了终止密码子以及半胱氨酸密码子。本发明的细菌双杂交纳米抗体筛选系统能够快速、高效、准确地筛选给定抗原的纳米抗体。

    添加固载微生物的膨胀珍珠岩修复混凝土裂缝的方法

    公开(公告)号:CN110282948A

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201910540591.4

    申请日:2019-06-21

    Abstract: 本发明公开了一种添加固载微生物的膨胀珍珠岩来修复混凝土裂缝的方法。所述方法先利用真空浸渍法,将矿化微生物科氏芽孢杆菌DSM6307菌悬液和乳酸钙在负压下吸附在膨胀珍珠岩颗粒表面及内部孔隙中,再在表面喷洒酵母浸膏溶液,得到固载细菌与乳酸钙的膨胀珍珠岩,然后均匀喷涂由偏高岭土、硅酸钠与水混合形成的浆体,得到自修复颗粒,经预湿处理后,加入混凝土中拌制,标准养护得到自修复的混凝土。本发明以膨胀珍珠岩为载体,可以大幅度的提高细菌存活率,不仅提高了混凝土的强度,同时对后期裂缝的修复有明显的效果,有利于提高地下工程、水电站、高层建筑等重大结构工程的安全性和耐久性等。

    振荡型基因表达系统、构建方法及其在鼠李糖脂发酵中的应用

    公开(公告)号:CN113122556B

    公开(公告)日:2024-02-13

    申请号:CN201911391503.5

    申请日:2019-12-30

    Abstract: 本发明公开了一种振荡型基因表达系统、构建方法及其在鼠李糖脂发酵中的应用。所述的振荡型基因表达系统含有启动子PluxI,阻遏基因tetR,启动子Ptet,应答调节因子基因LuxI和LuxR,蛋白降解标签基因ssrA。通过调控基因表达的周期性开关过程,振荡型基因表达系统可以缓解稳定生长期大肠杆菌代谢中间产物及能量的供给压力,使基因表达与底物供给达到平衡,进而提高次级代谢产物的产量。本发明通过在振荡型基因表达调控质粒中导入鼠李糖脂生物合成途径相关基因,实现鼠李糖脂在大肠杆菌中的异源合成,构建得到的高产鼠李糖脂的振荡型基因表达系统的工程菌,发酵产量达838mg/L。

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