公开(公告)号：CN108330132B

公开(公告)日：2021-06-18

申请号：CN201810123435.3

申请日：2018-02-07

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 诸葛强 ,  续晨 ,  周加宝 ,  董静 ,  魏辉 ,  尹佟明

IPC: C12N15/32 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种人工合成cry1Ah1基因及其应用，该人工合成cry1Ah1基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示或如SEQ ID NO.3所示。本发明选取Bt杀虫基因crylAh1基因野生型序列为原始序列对cry1Ah1基因编码区全长起始密码子开始第64nt‑1998nt杀虫关键区域共645个氨基酸，在不改变原有氨基酸一级序列的前提下进行密码子优化，获得cry1Ah1‑B基因和cry1Ah1‑U基因，将优化后的基因与优化前基因的所有基因翻译的蛋白经过tBlastX比较均完全一致。对转cry1Ah1改造基因植株的RT‑PCR鉴定分析，表明cry1Ah1‑B、cry1Ah1‑U与野生cry1Ah1基因表达效率有明显差别，转Bt基因杨树的ELISA测定结果表明，包括对照组在内的所有株系总蛋白量保持在24.013mg/g~26.667mg/g之间，虫试结果较为良好的株系中A‑3‑4、A‑5‑0、A‑5‑23和Z‑1‑3四个株系的毒蛋白含量在4669.38ng/g~9342.33ng/g之间，抗虫效果明显。

公开(公告)号：CN108330132A

公开(公告)日：2018-07-27

申请号：CN201810123435.3

申请日：2018-02-07

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 诸葛强 ,  续晨 ,  周加宝 ,  董静 ,  魏辉 ,  尹佟明

IPC: C12N15/32 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明公开了一种人工合成cry1Ah1基因及其应用，该人工合成cry1Ah1基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示或如SEQ ID NO.3所示。本发明选取Bt杀虫基因crylAh1基因野生型序列为原始序列对cry1Ah1基因编码区全长起始密码子开始第64nt-1998nt杀虫关键区域共645个氨基酸，在不改变原有氨基酸一级序列的前提下进行密码子优化，获得cry1Ah1-B基因和cry1Ah1-U基因，将优化后的基因与优化前基因的所有基因翻译的蛋白经过tBlastX比较均完全一致。对转cry1Ah1改造基因植株的RT-PCR鉴定分析，表明cry1Ah1-B、cry1Ah1-U与野生cry1Ah1基因表达效率有明显差别，转Bt基因杨树的ELISA测定结果表明，包括对照组在内的所有株系总蛋白量保持在24.013mg/g~26.667mg/g之间，虫试结果较为良好的株系中A-3-4、A-5-0、A-5-23和Z-1-3四个株系的毒蛋白含量在4669.38ng/g~9342.33ng/g之间，抗虫效果明显。