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公开(公告)号：CN102876760B
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201210404399.0
申请日：2012-10-22
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了枯草芽孢菌在高产腺苷且联产乙偶姻中的应用，所述的枯草芽孢菌（Bacillus subtilis）为CGMCC No.4484。本发明筛选到的菌株能利用多种碳源和氮源发酵生产腺苷且联产乙偶姻，通过在发酵培养基中添加柠檬酸钠能显著提高腺苷及乙偶姻的产量，操作方便简单，培养条件粗放，在5L发酵罐上能维持较高的水平，具有大规模工业化的潜力。
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公开(公告)号：CN101906126B
公开(公告)日：2012-04-25
申请号：CN201010107822.1
申请日：2010-02-09
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，该方法包括如下步骤：(1)胞二磷胆碱转化液经酶灭活、离心和超滤预处理；(2)将预处理后的胞二磷胆碱转化液调pH2.0～14.0后，加入无机盐配制成含有0.01～5mol/L无机盐和0.1～40g/L胞二磷胆碱的上柱液，经疏水层析树脂吸附，再经pH2.0～14.0的纯水洗脱；(3)将洗脱液经纳滤脱盐浓缩、结晶得到胞二磷胆碱。本发明的方法分离工艺简单，树脂洗脱结束后经再生处理，可反复利用，分离成本低廉，产品容易结晶，可得到高纯度、高收率的CDP-choline产品。
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公开(公告)号：CN101781346B
公开(公告)日：2012-04-25
申请号：CN201010121243.2
申请日：2010-03-10
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种从生物催化转化液中分离尿苷酸(UMP)的方法，该方法将生物催化转化液经离心、超滤、纳滤处理后，进入阴离子交换柱进行吸附，去离子水洗杂，无机盐溶液洗脱，洗脱液经纳滤处理除盐浓缩、结晶、干燥后得到高收率、高纯度的尿苷酸二钠晶体。分离总收率最高可达90％以上，纯度达98％。该方法具有树脂用量少、成本低、收率高、分离效果好、所得产品纯度高、可以适合大规模工业生产等优点。
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公开(公告)号：CN101805769A
公开(公告)日：2010-08-18
申请号：CN201010124103.0
申请日：2010-03-15
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
IPC: C12P19/30 , C12R1/01 , C12R1/185 , C12R1/265 , C12R1/645 , C12R1/72 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/78
Abstract: 本发明公开了一种生产尿嘧啶核苷酸的新方法，以乳清酸和磷酸根离子为底物，以葡萄糖为能量供体，加入小分子化学效应物质，利用有透性的微生物进行全细胞催化反应合成尿嘧啶核苷酸；当反应液中的葡萄糖浓度降低到0.02～0.08mol/L时，向反应液中流加培养液，维持反应液中的葡萄糖浓度在0.02～0.08mol/L，同时启动超滤装置将含有尿嘧啶核苷酸的反应液分离出去，并控制超滤装置的流出速率与培养液的流加速率相同以保持反应液的体积不变，收集超滤装置分离出来的液体。本发明方法准确、直接、简单，突破了反应平衡的限制，延长了反应周期，提高了尿苷酸的产量，减少了能耗，降低了生产成本，可实现产物的连续化分离生产。
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公开(公告)号：CN101768551A
公开(公告)日：2010-07-07
申请号：CN201019026024.3
申请日：2010-02-04
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种多级固定化酶膜反应装置，它包含N级串联的固定化酶膜反应器和一个纳滤装置；每一级固定化酶膜反应器内部设有圆筒，将截留分子量为1000～10000Da的膜装填在上述圆筒内侧，膜内侧表面上固定有蛋白酶；纳滤装置中设有截留分子量为100～500Da的纳滤膜；第1级反应器圆筒外部与第2级反应器圆筒内部相连通，以此类推，第N级反应器圆筒外部与纳滤装置相连通，第2级至第N级反应器圆筒内部分别与纳滤装置相连通；第1级至第N级反应器，其膜的截留分子量依次递减。本发明还公开了利用上述装置制备酪蛋白磷酸肽的方法。通过本发明可以同时制备出不同分子量和品质的酪蛋白磷酸肽，简化了生产过程，降低了生产成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101503723A
公开(公告)日：2009-08-12
申请号：CN200910025980.X
申请日：2009-03-16
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
IPC: C12P19/30
Abstract: 本发明公开了一种利用反应分离耦合技术制备核苷酸的方法，即用核酸酶P1酶解核糖核酸，结合酶解反应器及超滤装置和纳滤装置的反应分离耦合技术制备核苷酸。本发明方法利用超滤装置将酶解产物与RNA相分离，克服核苷酸生产过程中的产物抑制作用，提高了RNA的酶解率和核苷酸浓度，同时利用纳滤技术回收利用超滤过程流失的寡核苷酸，进一步提高了RNA的酶解率。本发明方法可实现产物的连续化分离生产，缩短了工艺流程，突破了化学平衡的限制，大大提高了酶的利用率以及反应收率，减少了能耗，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN101805769B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010124103.0
申请日：2010-03-15
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
IPC: C12P19/30 , C12R1/01 , C12R1/185 , C12R1/265 , C12R1/645 , C12R1/72 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/78
Abstract: 本发明公开了一种生产尿嘧啶核苷酸的新方法，以乳清酸和磷酸根离子为底物，以葡萄糖为能量供体，加入小分子化学效应物质，利用有透性的微生物进行全细胞催化反应合成尿嘧啶核苷酸；当反应液中的葡萄糖浓度降低到0.02～0.08mol/L时，向反应液中流加培养液，维持反应液中的葡萄糖浓度在0.02～0.08mol/L，同时启动超滤装置将含有尿嘧啶核苷酸的反应液分离出去，并控制超滤装置的流出速率与培养液的流加速率相同以保持反应液的体积不变，收集超滤装置分离出来的液体。本发明方法准确、直接、简单，突破了反应平衡的限制，延长了反应周期，提高了尿苷酸的产量，减少了能耗，降低了生产成本，可实现产物的连续化分离生产。
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公开(公告)号：CN101613672A
公开(公告)日：2009-12-30
申请号：CN200910183017.4
申请日：2009-08-04
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种不对称转化制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的重组大肠杆菌，它是导入羰酰还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因的大肠杆菌。本发明还公开了上述重组大肠杆菌的构建方法。利用上述重组大肠杆菌制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的方法：以4－氯乙酰乙酸乙酯为底物，以葡萄糖为辅助底物，以氧化型辅酶II为辅因子，由上述重组大肠杆菌进行转化反应得到(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯。本发明构建的重组大肠杆菌中PsCR酶活为18U/mg，BmGDH酶活为9U/mg，避免了添加昂贵的纯酶GDH和辅酶NADPH，只需添加辅酶NADP便可以使得辅酶NADPH高效再生，大大降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN101503724B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN200910025981.4
申请日：2009-03-16
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
IPC: C12P19/30 , C12R1/865 , C12R1/125 , C12R1/13 , C12R1/645 , C12R1/78 , C12R1/84 , C12R1/72 , C12R1/85 , C12R1/265 , C12R1/185 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种利用生物磷酰化技术制备核苷酸的新方法，以嘌呤或嘧啶类的核苷酸前体物质和磷酸根离子为底物，以葡萄糖作为核糖基团供体和能量供体，利用有透性的微生物细胞，通过化学小分子效应物质调控辅因子再生体系、物质能量偶联再生体系和代谢途径关键酶酶活，实现高效制备核苷酸。本发明采用小分子化学效应物质调控代谢流量，改善了能量及辅酶的再生及利用状况，使得代谢流向目标路径发生了迁移，代谢副产物减少，产物得率提高；本发明采用的改变细胞膜透性的方法加速了反应组分向微生物细胞的渗透，使得反应时间缩短，底物利用率提高。
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公开(公告)号：CN101768617B
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201019026027.7
申请日：2010-02-04
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种全细胞生物合成脱氧核苷三磷酸的方法，是以脱氧核苷一磷酸dNMP和磷酸根离子为底物，以糖为能量供体，利用有透性的酵母细胞，在化学效应物质的存在下反应来制备脱氧核苷三磷酸。本发明通过运用全细胞催化和代谢工程的原理，采用化学效应物质调控代谢流量，建立了高效的能量自耦联和再生系统，最终实现脱氧核苷三磷酸的高效制备。本发明克服了传统脱氧核苷三磷酸生产工艺的不足，具有工艺简单、转化率高、成本低，以及污染小等特点。
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