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公开(公告)号:CN101503724B
公开(公告)日:2012-11-14
申请号:CN200910025981.4
申请日:2009-03-16
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
IPC: C12P19/30 , C12R1/865 , C12R1/125 , C12R1/13 , C12R1/645 , C12R1/78 , C12R1/84 , C12R1/72 , C12R1/85 , C12R1/265 , C12R1/185 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种利用生物磷酰化技术制备核苷酸的新方法,以嘌呤或嘧啶类的核苷酸前体物质和磷酸根离子为底物,以葡萄糖作为核糖基团供体和能量供体,利用有透性的微生物细胞,通过化学小分子效应物质调控辅因子再生体系、物质能量偶联再生体系和代谢途径关键酶酶活,实现高效制备核苷酸。本发明采用小分子化学效应物质调控代谢流量,改善了能量及辅酶的再生及利用状况,使得代谢流向目标路径发生了迁移,代谢副产物减少,产物得率提高;本发明采用的改变细胞膜透性的方法加速了反应组分向微生物细胞的渗透,使得反应时间缩短,底物利用率提高。
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公开(公告)号:CN101503724A
公开(公告)日:2009-08-12
申请号:CN200910025981.4
申请日:2009-03-16
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
IPC: C12P19/30 , C12R1/01 , C12R1/185 , C12R1/265 , C12R1/85 , C12R1/72 , C12R1/84 , C12R1/78 , C12R1/645 , C12R1/13 , C12R1/125 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种利用生物磷酰化技术制备核苷酸的新方法,以嘌呤或嘧啶类的核苷酸前体物质和磷酸根离子为底物,以葡萄糖作为核糖基团供体和能量供体,利用有透性的微生物细胞,通过化学小分子效应物质调控辅因子再生体系、物质能量偶联再生体系和代谢途径关键酶酶活,实现高效制备核苷酸。本发明采用小分子化学效应物质调控代谢流量,改善了能量及辅酶的再生及利用状况,使得代谢流向目标路径发生了迁移,代谢副产物减少,产物得率提高;本发明采用的改变细胞膜透性的方法加速了反应组分向微生物细胞的渗透,使得反应时间缩短,底物利用率提高。
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公开(公告)号:CN101067116A
公开(公告)日:2007-11-07
申请号:CN200710022932.6
申请日:2007-05-25
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一株高产核酸酶P1的桔青霉菌及其选育方法。该桔青霉菌已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号CGMCC No.2014。该菌株的选育方法是对桔青霉孢子悬浮液进行低能离子束注入,再将诱变后的孢子转接于平板培养基中培养,挑选单个菌株转接于麦芽汁斜面培养,后经液体发酵培养,筛选出产核酸酶P1酶活高的菌株。该菌株经30代以上传代,得高产性状稳定的菌株。本发明采用低能离子束注入的方法,诱变效果好,正突变率高,且操作安全,菌株经发酵产生的核酸酶P1的酶活提高了3~5倍,高产性状稳定,不易丢失,经3吨发酵罐培养后酶活力仍能保持较高水平,适合大规模工业化生产。
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公开(公告)号:CN100532536C
公开(公告)日:2009-08-26
申请号:CN200710022932.6
申请日:2007-05-25
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一株高产核酸酶P1的桔青霉菌及其选育方法。该桔青霉菌已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号CGMCC No.2014。该菌株的选育方法是对桔青霉孢子悬浮液进行低能离子束注入,再将诱变后的孢子转接于平板培养基中培养,挑选单个菌株转接于麦芽汁斜面培养,后经液体发酵培养,筛选出产核酸酶P1酶活高的菌株。该菌株经30代以上传代,得高产性状稳定的菌株。本发明采用低能离子束注入的方法,诱变效果好,正突变率高,且操作安全,菌株经发酵产生的核酸酶P1的酶活提高了3~5倍,高产性状稳定,不易丢失,经3吨发酵罐培养后酶活力仍能保持较高水平,适合大规模工业化生产。
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公开(公告)号:CN101503723A
公开(公告)日:2009-08-12
申请号:CN200910025980.X
申请日:2009-03-16
Applicant: 南京工业大学 , 南京同凯兆业生物技术有限责任公司
IPC: C12P19/30
Abstract: 本发明公开了一种利用反应分离耦合技术制备核苷酸的方法,即用核酸酶P1酶解核糖核酸,结合酶解反应器及超滤装置和纳滤装置的反应分离耦合技术制备核苷酸。本发明方法利用超滤装置将酶解产物与RNA相分离,克服核苷酸生产过程中的产物抑制作用,提高了RNA的酶解率和核苷酸浓度,同时利用纳滤技术回收利用超滤过程流失的寡核苷酸,进一步提高了RNA的酶解率。本发明方法可实现产物的连续化分离生产,缩短了工艺流程,突破了化学平衡的限制,大大提高了酶的利用率以及反应收率,减少了能耗,降低了生产成本。
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