公开(公告)号：CN104450595A

公开(公告)日：2015-03-25

申请号：CN201410799625.9

申请日：2014-12-19

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  顾峰 ,  徐铮 ,  梁金丰 ,  李莎 ,  冯小海

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P13/14 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/88 ,  C12P13/14 ,  C12Y401/01015

Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶重组菌，它是将来源于大肠杆菌E.coil JM109的谷氨酸脱羧酶基因导入进野生大肠杆菌NG-1中，所述的谷氨酸脱羧酶基因如SEQ ID No：1所示。本发明还公开了上述重组菌的构建方法与应用。本发明优点是：(1)酶活高，条件温和，反应时间短，仅需20h，底物DL型Glu浓度高达315g/L彻底反应完全，产物D-谷氨酸浓度达170g/L；(2)发酵起始调pH4.8后，发酵过程中不需要全程控制pH不变，也降低工艺成本；(3)细菌可重复15次利用；(4)工艺简便，绿色环保，且产品纯度99％以上。

公开(公告)号：CN103484419A

公开(公告)日：2014-01-01

申请号：CN201310469515.1

申请日：2013-10-10

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  许露 ,  顾峰 ,  詹伊婧 ,  李莎

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12P13/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶重组菌，它是导入了L-谷氨酸脱羧酶GAD基因的大肠杆菌；其中所述的L-谷氨酸脱羧酶GAD基因来源于酵母Kodamaea ohmeri NH-9，其核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。本发明还公开了上述谷氨酸脱羧酶重组菌构建方法和应用。本发明具有如下优势：（1）盐酸吡哆醛价格是5’-磷酸吡哆醛的一半，降低工艺成本；（2）酶活高，反应时间短，条件温和，底物浓度高达510g/L，产物γ-氨基丁酸浓度达352g/L；（3）细菌及旋转蒸发后的缓冲液均可重复利用，转化率100%，收率不低于99%；（4）工艺简便，绿色环保，且产品纯度99%以上。

公开(公告)号：CN104450595B

公开(公告)日：2018-04-13

申请号：CN201410799625.9

申请日：2014-12-19

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  顾峰 ,  徐铮 ,  梁金丰 ,  李莎 ,  冯小海

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P13/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶重组菌，它是将来源于大肠杆菌E.coil JM109的谷氨酸脱羧酶基因导入进野生大肠杆菌NG‑1中，所述的谷氨酸脱羧酶基因如SEQ ID No：1所示。本发明还公开了上述重组菌的构建方法与应用。本发明优点是：(1)酶活高，条件温和，反应时间短，仅需20h，底物DL型Glu浓度高达315g/L彻底反应完全，产物D‑谷氨酸浓度达170g/L；(2)发酵起始调pH4.8后，发酵过程中不需要全程控制pH不变，也降低工艺成本；(3)细菌可重复15次利用；(4)工艺简便，绿色环保，且产品纯度99％以上。

公开(公告)号：CN103484419B

公开(公告)日：2015-08-05

申请号：CN201310469515.1

申请日：2013-10-10

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  许露 ,  顾峰 ,  詹伊婧 ,  李莎

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12P13/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶重组菌，它是导入了L-谷氨酸脱羧酶GAD基因的大肠杆菌；其中所述的L-谷氨酸脱羧酶GAD基因来源于酵母Kodamaea ohmeri NH-9，其核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。本发明还公开了上述谷氨酸脱羧酶重组菌构建方法和应用。本发明具有如下优势：（1）盐酸吡哆醛价格是5’-磷酸吡哆醛的一半，降低工艺成本；（2）酶活高，反应时间短，条件温和，底物浓度高达510g/L，产物γ-氨基丁酸浓度达352g/L；（3）细菌及旋转蒸发后的缓冲液均可重复利用，转化率100%，收率不低于99%；（4）工艺简便，绿色环保，且产品纯度99%以上。