公开(公告)号：CN112725343B

公开(公告)日：2024-10-11

申请号：CN202110086530.2

申请日：2021-01-22

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 王玉珍 ,  赵桥

IPC: C12N15/115 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明涉及化学、生物技术领域，具体涉及了一种联合金纳米探针和CRISPR‑Cas的蛋白标志物检测方法。将免疫分析、纳米技术和CRISPR检测技术三者相结合，通过在金纳米粒子上共价连接适配体和CRISPR激活链得到金纳米探针。通过抗体与适配体对蛋白标志物的特异性识别作用，在96孔酶标板中形成抗体‑分析物‑金纳米探针的夹心结构。金纳米探针上的激活链可以激活CRISPR蛋白的旁切割活性，切割荧光报告分子产生荧光信号，从而对分析物进行定量检测。本发明利用金纳米探针实现了分析物识别信号到CRISPR旁切割活性信号的转化，同时实现了激活链信号的放大。所述检测方法操作简单、灵敏度高、特异性强和检测线性范围宽。

公开(公告)号：CN112725343A

公开(公告)日：2021-04-30

申请号：CN202110086530.2

申请日：2021-01-22

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 王玉珍 ,  赵桥

IPC: C12N15/115 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明涉及化学、生物技术领域，具体涉及了一种联合金纳米探针和CRISPR‑Cas的蛋白标志物检测方法。将免疫分析、纳米技术和CRISPR检测技术三者相结合，通过在金纳米粒子上共价连接适配体和CRISPR激活链得到金纳米探针。通过抗体与适配体对蛋白标志物的特异性识别作用，在96孔酶标板中形成抗体‑分析物‑金纳米探针的夹心结构。金纳米探针上的激活链可以激活CRISPR蛋白的旁切割活性，切割荧光报告分子产生荧光信号，从而对分析物进行定量检测。本发明利用金纳米探针实现了分析物识别信号到CRISPR旁切割活性信号的转化，同时实现了激活链信号的放大。所述检测方法操作简单、灵敏度高、特异性强和检测线性范围宽。