公开(公告)号：CN101289687A

公开(公告)日：2008-10-22

申请号：CN200810123847.3

申请日：2008-06-10

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  环民霞 ,  任贲 ,  冯小海 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯

IPC: C12Q1/04 ,  G01N30/90 ,  G01N21/78 ,  G01N30/36

Abstract: 本发明公开了一种高活力高产物特异性蔗糖异构酶生产菌株的高通量筛选方法，即将待筛选的蔗糖异构酶生产菌接入含有培养基的微孔板中振荡培养，离心去除上清液，加入蔗糖溶液进行酶转化反应，反应结束后，将每孔的上清液依次转移至另一微孔板中，加入显色试剂，并检测吸光值，筛选出蔗糖异构酶高产菌株再进行摇瓶复筛，利用薄层色谱筛选产物特异性较好的菌株，最终得到高产异麦芽酮糖的菌株或高产海藻酮糖的菌株。该筛选方法利用直观的显色反应，以及酶标板微培养、连续加样器和排枪的作用，可达到每人200样/日以上的处理量，为高产物特异性蔗糖异构酶产生菌的筛选提供了简便、高效、微量的筛选方法。

公开(公告)号：CN101289687B

公开(公告)日：2015-12-16

申请号：CN200810123847.3

申请日：2008-06-10

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  环民霞 ,  任贲 ,  冯小海 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯

IPC: C12Q1/04 ,  G01N30/90 ,  G01N21/78 ,  G01N30/36

Abstract: 本发明公开了一种高活力高产物特异性蔗糖异构酶生产菌株的高通量筛选方法，即将待筛选的蔗糖异构酶生产菌接入含有培养基的微孔板中振荡培养，离心去除上清液，加入蔗糖溶液进行酶转化反应，反应结束后，将每孔的上清液依次转移至另一微孔板中，加入显色试剂，并检测吸光值，筛选出蔗糖异构酶高产菌株再进行摇瓶复筛，利用薄层色谱筛选产物特异性较好的菌株，最终得到高产异麦芽酮糖的菌株或高产海藻酮糖的菌株。该筛选方法利用直观的显色反应，以及酶标板微培养、连续加样器和排枪的作用，可达到每人200样/日以上的处理量，为高产物特异性蔗糖异构酶产生菌的筛选提供了简便、高效、微量的筛选方法。

公开(公告)号：CN101200750B

公开(公告)日：2010-09-29

申请号：CN200710190755.2

申请日：2007-11-29

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  环民霞 ,  林璐 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯

IPC: C12N1/20 ,  C12P19/12 ,  C12R1/18

Abstract: 本发明公开一种大黄欧文氏菌(Erwinia rhapontici)NX-5及利用该菌生产蔗糖异构酶进而制备异麦芽酮糖的方法。将该菌株CGMCC No.2222接种于含碳源、氮源、无机盐和水的无菌培养基中进行好气培养，离心或超滤获得含蔗糖异构酶的细胞，进而直接采用游离的含蔗糖异构酶的细胞转化蔗糖生成异麦芽酮糖或固定化含蔗糖异构酶的细胞后转化蔗糖生成异麦芽酮糖。采用该菌株使蔗糖转化率高达99.5％(w/w)，异麦芽酮糖转化率达90％，转化液中异麦芽酮糖浓度达500g/L，无水解副反应，转化液中几乎不含葡萄糖和果糖，随着反应进行也不会使产物异麦芽酮糖转化为其他成分，对工业化生产异麦芽酮糖十分有益。

公开(公告)号：CN101200750A

公开(公告)日：2008-06-18

申请号：CN200710190755.2

申请日：2007-11-29

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  环民霞 ,  林璐 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯

IPC: C12P19/12 ,  C12R1/18

Abstract: 本发明公开一种大黄欧文氏菌(Erwiniarhapontici)NX－5及利用该菌生产蔗糖异构酶进而制备异麦芽酮糖的方法。将该菌株CGMCC No.2222接种于含碳源、氮源、无机盐和水的无菌培养基中进行好气培养，离心或超滤获得含蔗糖异构酶的细胞，进而直接采用游离的含蔗糖异构酶的细胞转化蔗糖生成异麦芽酮糖或固定化含蔗糖异构酶的细胞后转化蔗糖生成异麦芽酮糖。采用该菌株使蔗糖转化率高达99.5％(w/w)，异麦芽酮糖转化率达90％，转化液中异麦芽酮糖浓度达500g/L，无水解副反应，转化液中几乎不含葡萄糖和果糖，随着反应进行也不会使产物异麦芽酮糖转化为其他成分，对工业化生产异麦芽酮糖十分有益。