公开(公告)号：CN101906430A

公开(公告)日：2010-12-08

申请号：CN201010105767.2

申请日：2010-02-02

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  任贲 ,  蔡恒 ,  汪晨

IPC: C12N15/61 ,  C12N9/90 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P19/12 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种蔗糖异构酶基因，pal I基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还公开了上述基因的编码蛋白质，SIase酶。本发明还公开了包含上述基因的表达载体及宿主细胞，以及该基因的高效表达方法。包含上述蔗糖异构酶基因的重组菌具有异构的活性，能转化蔗糖生成异麦芽酮糖。该重组菌稳定性好，催化效率高，产物特异性明显改善，可应用于异麦芽酮糖的工业生产中。

公开(公告)号：CN101289687A

公开(公告)日：2008-10-22

申请号：CN200810123847.3

申请日：2008-06-10

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  环民霞 ,  任贲 ,  冯小海 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯

IPC: C12Q1/04 ,  G01N30/90 ,  G01N21/78 ,  G01N30/36

Abstract: 本发明公开了一种高活力高产物特异性蔗糖异构酶生产菌株的高通量筛选方法，即将待筛选的蔗糖异构酶生产菌接入含有培养基的微孔板中振荡培养，离心去除上清液，加入蔗糖溶液进行酶转化反应，反应结束后，将每孔的上清液依次转移至另一微孔板中，加入显色试剂，并检测吸光值，筛选出蔗糖异构酶高产菌株再进行摇瓶复筛，利用薄层色谱筛选产物特异性较好的菌株，最终得到高产异麦芽酮糖的菌株或高产海藻酮糖的菌株。该筛选方法利用直观的显色反应，以及酶标板微培养、连续加样器和排枪的作用，可达到每人200样/日以上的处理量，为高产物特异性蔗糖异构酶产生菌的筛选提供了简便、高效、微量的筛选方法。

公开(公告)号：CN101289687B

公开(公告)日：2015-12-16

申请号：CN200810123847.3

申请日：2008-06-10

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  环民霞 ,  任贲 ,  冯小海 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯

IPC: C12Q1/04 ,  G01N30/90 ,  G01N21/78 ,  G01N30/36

Abstract: 本发明公开了一种高活力高产物特异性蔗糖异构酶生产菌株的高通量筛选方法，即将待筛选的蔗糖异构酶生产菌接入含有培养基的微孔板中振荡培养，离心去除上清液，加入蔗糖溶液进行酶转化反应，反应结束后，将每孔的上清液依次转移至另一微孔板中，加入显色试剂，并检测吸光值，筛选出蔗糖异构酶高产菌株再进行摇瓶复筛，利用薄层色谱筛选产物特异性较好的菌株，最终得到高产异麦芽酮糖的菌株或高产海藻酮糖的菌株。该筛选方法利用直观的显色反应，以及酶标板微培养、连续加样器和排枪的作用，可达到每人200样/日以上的处理量，为高产物特异性蔗糖异构酶产生菌的筛选提供了简便、高效、微量的筛选方法。

公开(公告)号：CN101906430B

公开(公告)日：2012-09-05

申请号：CN201010105767.2

申请日：2010-02-02

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  任贲 ,  蔡恒 ,  汪晨

IPC: C12N15/61 ,  C12N9/90 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P19/12 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种蔗糖异构酶基因，pal I基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还公开了上述基因的编码蛋白质，SIase酶。本发明还公开了包含上述基因的表达载体及宿主细胞，以及该基因的高效表达方法。包含上述蔗糖异构酶基因的重组菌具有异构的活性，能转化蔗糖生成异麦芽酮糖。该重组菌稳定性好，催化效率高，产物特异性明显改善，可应用于异麦芽酮糖的工业生产中。