公开(公告)号：CN106906253A

公开(公告)日：2017-06-30

申请号：CN201710191578.3

申请日：2017-03-28

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  承豪 ,  陈勇 ,  邹亚男 ,  赵南 ,  柳东 ,  牛欢清 ,  吴菁岚 ,  庄伟

IPC: C12P7/56 ,  C12N11/12 ,  C12R1/07

CPC classification number: C12P7/56 ,  C12N11/12

Abstract: 本发明公开了一种利用表面固定化技术发酵生产L‑乳酸的方法，包括如下步骤：(1)菌种固定化：将凝结芽孢杆菌种子液接入发酵罐中，温度40～60℃、发酵液pH值为5.5～7.0、搅拌速度50～200rpm培养48～108h，最后将发酵罐中的培养物打入固定化反应器中，循环流速为30～100mL/min，循环时间为72～132h；(2)发酵：将发酵罐和固定化反应器中的培养基泵出，再泵入新的发酵培养基开始固定化发酵。本发明的单批发酵与传统的单批游离细胞发酵相比，发酵速率提高了0.62～0.88g/L/h，发酵时间由144～168h缩短至72～132h，产物得率提高了1.74％～15.42％(w/w)。

公开(公告)号：CN105601720B

公开(公告)日：2019-04-30

申请号：CN201610142029.2

申请日：2016-03-11

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  徐煜 ,  陈勇 ,  朱杰 ,  柳东 ,  牛欢清 ,  吴菁岚 ,  朱晨杰 ,  庄伟

IPC: C07K14/00 ,  C12N15/11 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/67 ,  C12N9/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种介导蛋白质分泌表达的信号肽，属于蛋白质工程和基因工程领域。通过对已知的信号肽PelB和OmpA进行改造，其N端具有信号肽OmpA的前三个氨基酸残基MKK；C端具有信号肽OmpA的后三个氨基酸残基AQA；而中间的疏水结构则是信号肽PelB的疏水序列LLPTAAAGLLLLAAQP。本发明所述的可有效提高蛋白分泌效率的信号肽，使用后显著的提高了菌株的对目的蛋白的分泌表达能力，本发明中可将目标蛋白磷脂酶D的胞外酶活提高2倍，改造后的菌株胞外产酶能力显著提高，更利于工业化应用。

公开(公告)号：CN105601720A

公开(公告)日：2016-05-25

申请号：CN201610142029.2

申请日：2016-03-11

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  徐煜 ,  陈勇 ,  朱杰 ,  柳东 ,  牛欢清 ,  吴菁岚 ,  朱晨杰 ,  庄伟

IPC: C07K14/00 ,  C12N15/11 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/67 ,  C12N9/16 ,  C12R1/19

CPC classification number: C07K14/00 ,  C12N9/16 ,  C12N15/67 ,  C12N15/70 ,  C12N2800/101 ,  C12Y301/04004

Abstract: 本发明公开了一种介导蛋白质分泌表达的信号肽，属于蛋白质工程和基因工程领域。通过对已知的信号肽PelB和OmpA进行改造，其N端具有信号肽OmpA的前三个氨基酸残基MKK；C端具有信号肽OmpA的后三个氨基酸残基AQA；而中间的疏水结构则是信号肽PelB的疏水序列LLPTAAAGLLLLAAQP。本发明所述的可有效提高蛋白分泌效率的信号肽，使用后显著的提高了菌株的对目的蛋白的分泌表达能力，本发明中可将目标蛋白磷脂酶D的胞外酶活提高2倍，改造后的菌株胞外产酶能力显著提高，更利于工业化应用。