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公开(公告)号：CN113136381B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202110453185.1
申请日：2021-04-26
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/18 , C12N11/089 , C12N11/087 , C12N11/082 , C12N9/88 , C12N9/06 , C12N9/02 , C12P7/40 , C12P13/00 , C12M1/40
Abstract: 本发明公开了一种多酶连体纳米反应器的制备方法及其在同步合成上的应用。该方法基于多酶反应器的角度，以构建多酶整体反应器进而实现不同催化功能的隔室化，促进CO2原位快速全捕捉，提高甲酸得率。其次本发明通过多酶整体反应器实现酸碱零添加的生物脱羧和甲酸同步绿色合成，提高了甲酸的产量。该方法反应条件温和，选择性高，过程绿色友好，在不影响生物脱羧的前提下，避免生物脱羧过程中的碳损失以及微环境迅速碱化对甲酸的抑制。
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公开(公告)号：CN113061158B
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202110340236.X
申请日：2021-03-30
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用二价金属离子与组氨酸标签纯化并固定化蛋白的方法及其应用。该方法基于固定化酶的角度，以固定化酶进而提高蛋白的耐受性和重复利用性。其次本发明通过二价金属离子与组氨酸标签的结合实现对蛋白的纯化和固定化，进而提高目标蛋白的酶活。该方法的过程简单，价格低廉，用于含组氨酸标签的蛋白的分离纯化和固定化的操作简单，时间较短，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113373137B
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202110693907.0
申请日：2021-06-22
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/089 , C12N11/04 , C12N11/02 , C12P13/00 , C12P7/40
Abstract: 本发明公开了一种光活性人工细胞的构建方法及其在同步绿色合成戊二胺和甲酸上的应用。该方法基于人工细胞的角度，以构建人工细胞进而实现在同一个纳米空间内进行不同的催化反应，促进生物脱羧释放的CO2快速全捕捉，提高甲酸得率；其次本发明通过人工细胞实现酸碱零添加的生物脱羧和甲酸同步绿色合成，提高了甲酸的产量，同时利用太阳能为人工细胞提供还原力。该方法反应条件温和，选择性高，过程绿色友好，利用无限可再生的太阳能提供还原力，降低生产成本，在不影响生物脱羧的前提下，避免生物脱羧过程中的碳损失以及微环境迅速碱化对甲酸合成的抑制。
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公开(公告)号：CN114395573B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202210085700.X
申请日：2022-01-25
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用反乌头酸脱羧酶提高全细胞催化产衣康酸产量的方法，由擎科生物将玉米黑粉菌来源的反乌头酸脱羧酶（TcadA），优化合成，得到pETduet‑TcadA，与重组质粒pCDFduet‑acn‑cadA共转入大肠杆菌进行异源表达，采用全细胞催化法生产衣康酸，与出发菌株pCDFduet‑acn‑cadA）相比，有效提高了衣康酸的产量。本发明生产衣康酸使用了全细胞催化法，与常规发酵相比，可以降低生产成本，缩短生产时间。此外，底物易于获得，生物转化产生的副产品较少，便于提纯，有效克服传统合成方法的产物复杂的缺点，并在工业生产中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN113999807B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202111287718.X
申请日：2021-11-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组菌株的构建方法及其在产衣康酸上的应用，通过对顺乌头酸脱羧酶基因cadA进行定点突变，使得天然的顺乌头酸脱羧酶基因cadA的第470位的Arg突变为Glu，然后转入大肠杆菌进行异源表达。定点突变使用的是大引物PCR方法，该方法操作简单便捷，突变率高，且成本较低。本发明生产衣康酸使用了全细胞催化法，与常规发酵相比，可以降低生产成本，缩短生产时间，有效提高衣康酸的产量。此外，底物易于获得，生物转化产生的副产品较少，便于提纯，有效克服传统合成方法的产物复杂的缺点，并在工业生产中具有广泛的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113943372A
公开(公告)日：2022-01-18
申请号：CN202111321839.1
申请日：2021-11-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用三价钴离子提高固定化蛋白稳定性的方法。该方法基于固定化蛋白的角度，以固定化蛋白进而提高蛋白的耐受性和重复利用性；其次通过三价钴离子与组氨酸标签的结合实现对蛋白的固定化，进而提高目标蛋白的活性。该方法的过程简单，价格低廉，用于含组氨酸标签的蛋白的固定化的操作简单，时间较短，且相比于二价钴离子与组氨酸标签的结合，三价钴离子的稳定性更好，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114395573A
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN202210085700.X
申请日：2022-01-25
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用反乌头酸脱羧酶提高全细胞催化产衣康酸产量的方法，由擎科生物将玉米黑粉菌来源的反乌头酸脱羧酶（TcadA），优化合成，得到pETduet‑TcadA，与重组质粒pCDFduet‑acn‑cadA共转入大肠杆菌进行异源表达，采用全细胞催化法生产衣康酸，与出发菌株（pCDFduet‑acn‑cadA）相比，有效提高了衣康酸的产量。本发明生产衣康酸使用了全细胞催化法，与常规发酵相比，可以降低生产成本，缩短生产时间。此外，底物易于获得，生物转化产生的副产品较少，便于提纯，有效克服传统合成方法的产物复杂的缺点，并在工业生产中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN114214309A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111649442.5
申请日：2021-12-30
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种合成蛋白骨架纳米材料的方法及其在固定化酶上的应用。取10‑100 mg/mL的蛋白溶液1mL,50‑300 rpm下加入6 mLDMSO、最后加入Tris‑HCl缓冲溶液，形成白色沉淀后，提高转速反应30 min，反应完成后在4℃下静置12 h，得白色悬浊液，其中，Tris‑HCl缓冲溶液的体积需大于反应体系总体积的3%；将白色悬浊液以4000‑8000 rpm的速度梯度离心10 min，弃去上清后，用等体积的有机试剂或水洗涤3次，得蛋白骨架纳米材料。本发明制备工艺简单，成本低廉，反应过程基本仅需要简单搅拌，反应物市面上均可买到且价格低廉，且不会产生有毒有害的副产物，对环境友好。
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公开(公告)号：CN113136381A
公开(公告)日：2021-07-20
申请号：CN202110453185.1
申请日：2021-04-26
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N11/18 , C12N11/089 , C12N11/087 , C12N11/082 , C12N9/88 , C12N9/06 , C12N9/02 , C12P7/40 , C12P13/00 , C12M1/40
Abstract: 本发明公开了一种多酶连体纳米反应器的制备方法及其在同步合成上的应用。该方法基于多酶反应器的角度，以构建多酶整体反应器进而实现不同催化功能的隔室化，促进CO2原位快速全捕捉，提高甲酸得率。其次本发明通过多酶整体反应器实现酸碱零添加的生物脱羧和甲酸同步绿色合成，提高了甲酸的产量。该方法反应条件温和，选择性高，过程绿色友好，在不影响生物脱羧的前提下，避免生物脱羧过程中的碳损失以及微环境迅速碱化对甲酸的抑制。
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公开(公告)号：CN113999807A
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN202111287718.X
申请日：2021-11-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组菌株的构建方法及其在产衣康酸上的应用，通过对顺乌头酸脱羧酶基因cadA进行定点突变，使得天然的顺乌头酸脱羧酶基因cadA的第470位的Arg突变为Glu，然后转入大肠杆菌进行异源表达。定点突变使用的是大引物PCR方法，该方法操作简单便捷，突变率高，且成本较低。本发明生产衣康酸使用了全细胞催化法，与常规发酵相比，可以降低生产成本，缩短生产时间，有效提高衣康酸的产量。此外，底物易于获得，生物转化产生的副产品较少，便于提纯，有效克服传统合成方法的产物复杂的缺点，并在工业生产中具有广泛的应用前景。
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