公开(公告)号：CN115181169A

公开(公告)日：2022-10-14

申请号：CN202210730738.8

申请日：2022-06-24

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 李莎 ,  薛瑞 ,  徐虹 ,  冯欣欣 ,  王瑞 ,  黄巍巍

IPC: C07K14/435 ,  C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C12N1/21 ,  C07K1/22 ,  A61L24/10 ,  G16C10/00 ,  G16B20/50 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种提高重组贻贝蛋白黏附力的方法，该方法通过生物信息学和分子动力学模拟，计算蛋白质分子氨基酸残基的溶剂可及性，对残基位点进行定点突变。本发明中分别将野生型厚壳贻贝3型蛋白Mcofp‑3A的N33、N46、N62位点、野生型地中海贻贝3A型蛋白Mgfp‑3A的G41、N44位点和野生型地中海贻贝3B型蛋白Mgfp‑3B的G33、N43、N76位点的氨基酸突变成对贻贝蛋白起黏附作用的酪氨酸后，突变蛋白的表达无明显变化，具有SEQ ID NO.1～8中的任意一项所示的氨基酸序列，其黏附性能均有所提升，在水溶液、盐溶液中搭接18h后分别较本体蛋白的黏附力提高16‑38％、12‑82％。

公开(公告)号：CN116515164B

公开(公告)日：2024-03-19

申请号：CN202310605656.5

申请日：2023-05-26

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 李莎 ,  冯欣欣 ,  王瑞 ,  邱益彬 ,  黄巍巍 ,  徐虹

IPC: C08J9/42 ,  A61L26/00 ,  A61L27/26 ,  A61L27/50 ,  A61L27/52 ,  A61L27/54 ,  C08J9/28 ,  C08L29/04 ,  C08L5/04

Abstract: 本发明公开了一种贻贝蛋白抗菌水凝胶及其制备方法与应用，将聚乙烯醇水溶液和海藻酸钠水溶液按照不同比例混合均匀，经脱气处理，冷冻‑解冻两次转变为复合水凝胶，随后浸泡在贻贝蛋白乙酸溶液中，最后取出放在室温里吹干得到均匀的抗菌水凝胶。本发明制备工艺简单，易操作，制得的贻贝蛋白‑聚乙烯醇‑海藻酸钠抗菌水凝胶不仅能提高水凝胶的细胞黏附和增殖性能，还能增加一定的抗菌性能和抗氧化性能。该水凝胶呈现多孔结构，能够模拟人体皮肤细胞外基质(ECM)的环境，具有优异的生物相容性，对细胞黏附和生长的有促进作用，对人体无害，有作为理想的敷料的潜能。

公开(公告)号：CN115181169B

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202210730738.8

申请日：2022-06-24

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 李莎 ,  薛瑞 ,  徐虹 ,  冯欣欣 ,  王瑞 ,  黄巍巍

IPC: C07K14/435 ,  C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C12N1/21 ,  C07K1/22 ,  A61L24/10 ,  G16C10/00 ,  G16B20/50 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种提高重组贻贝蛋白黏附力的方法，该方法通过生物信息学和分子动力学模拟，计算蛋白质分子氨基酸残基的溶剂可及性，对残基位点进行定点突变。本发明中分别将野生型厚壳贻贝3型蛋白Mcofp‑3A的N33、N46、N62位点、野生型地中海贻贝3A型蛋白Mgfp‑3A的G41、N44位点和野生型地中海贻贝3B型蛋白Mgfp‑3B的G33、N43、N76位点的氨基酸突变成对贻贝蛋白起黏附作用的酪氨酸后，突变蛋白的表达无明显变化，具有SEQ ID NO.1～8中的任意一项所示的氨基酸序列，其黏附性能均有所提升，在水溶液、盐溶液中搭接18h后分别较本体蛋白的黏附力提高16‑38％、12‑82％。(56)对比文件Qingye Lu等.Adhesion of mussel footproteins to different substrate surfaces.《J R Soc Interface》.2013,第10卷(第79期),第1-11页.

公开(公告)号：CN117904165A

公开(公告)日：2024-04-19

申请号：CN202410047963.0

申请日：2024-01-12

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 李莎 ,  冯欣欣 ,  王瑞 ,  邱益彬 ,  徐虹

IPC: C12N15/75 ,  C07K14/435 ,  C12P21/02 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种胞外分泌贻贝蛋白的重组解淀粉芽孢杆菌及其构建方法与应用。本发明通过分子生物学手段，将贻贝蛋白基因Mgfp‑3B序列基于解淀粉芽孢杆菌密码子使用偏好全合成得到优化的基因片段，与组成型质粒pMA5连接，转化到解淀粉芽孢杆菌B.amyloliquefaciens NFΔSE中，获得重组解淀粉芽孢杆菌，实现了贻贝蛋白的胞外分泌，在7.5L发酵罐中产量达到120‑150mg/L。本发明利用重组解淀粉芽孢杆菌胞外分泌贻贝蛋白，能够有效避免胞内表达的细胞毒性，简化了后续复性的纯化操作，简化了制备工艺，为以解淀粉芽孢杆菌为底盘菌株，分泌表达重组蛋白提供了有益借鉴。

公开(公告)号：CN116515164A

公开(公告)日：2023-08-01

申请号：CN202310605656.5

申请日：2023-05-26

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 李莎 ,  冯欣欣 ,  王瑞 ,  邱益彬 ,  黄巍巍 ,  徐虹

IPC: C08J9/42 ,  A61L26/00 ,  A61L27/26 ,  A61L27/50 ,  A61L27/52 ,  A61L27/54 ,  C08J9/28 ,  C08L29/04 ,  C08L5/04

Abstract: 本发明公开了一种贻贝蛋白抗菌水凝胶及其制备方法与应用，将聚乙烯醇水溶液和海藻酸钠水溶液按照不同比例混合均匀，经脱气处理，冷冻‑解冻两次转变为复合水凝胶，随后浸泡在贻贝蛋白乙酸溶液中，最后取出放在室温里吹干得到均匀的抗菌水凝胶。本发明制备工艺简单，易操作，制得的贻贝蛋白‑聚乙烯醇‑海藻酸钠抗菌水凝胶不仅能提高水凝胶的细胞黏附和增殖性能，还能增加一定的抗菌性能和抗氧化性能。该水凝胶呈现多孔结构，能够模拟人体皮肤细胞外基质(ECM)的环境，具有优异的生物相容性，对细胞黏附和生长的有促进作用，对人体无害，有作为理想的敷料的潜能。