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公开(公告)号：CN116413321A
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202111680190.2
申请日：2021-12-31
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/327
Abstract: 本发明首次实现了COF的DNA功能化，并以此为基础构建了一种电化学探针以用于外泌体的检测，为COF在生物传感中的应用提供了一种新思路。本发明设计了一种负载用信号分子并具有靶向能力的COF探针，将得到的COF复合物进一步互补上胆固醇标记的DNA，以赋予其靶向外泌体的能力。基于得到的COF探针，我们研发了一种三明治型的电化学探针，用于外泌体的灵敏检测。传感器的性能被进行了优化和评估，展现出了优异的检测能力。本章的工作首次合成了负载有小分子货物的DNA功能化COF纳米颗粒，并且验证了其作为电化学探针的能力。本工作将进一步促进COF这一新型纳米材料在生物医学领域的应用。
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公开(公告)号：CN119662772A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202311218960.0
申请日：2023-09-20
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明中，我们开发了一种灵敏度高、操作简单的细胞膜碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)的定量方法。具体而言，我们设计了磷酸基团与胍基相互作用介导的分支肽组装，该组装结构会因ALP催化多肽去磷酸化而被破坏，从而释放出带电荷的多肽，并导致金纳米颗粒的分散程度发生变化、实现比色信号输出。因此，通过这种肽组装的调控可以将细胞膜上ALP的原位识别转化为定量信号，并且无需逐步的标记以及蛋白质的分离纯化。同时，利用具有分支结构的多肽对信号进行放大，使得本方法具有较高的灵敏度。结果表明，本方法具备对HepG2细胞膜上低至34 pg/cell ALP进行定量测定的能力，并且，通过量化细胞膜ALP的表达水平，本方法能够对6种不同细胞系进行区分。
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公开(公告)号：CN111443049B
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN201910046219.8
申请日：2019-01-17
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及了一种锆基金属‑有机框架和单链DNA修饰金纳米颗粒的比色阵列传感器的制备方法及应用。通过设计了6种不同的单链DNA序列修饰在金纳米颗粒表面，形成独特的传感器识别元件。新型材料锆基金属有机框架通过不同的分子间作用力，可以结合并沉淀单链DNA序列修饰在金纳米颗粒，在某些蛋白质或精液样本的加入后，可以加速或减缓他们的结合力，影响其聚集行为，从而产生可检测的信号。因此，我们可以认为这些识别元件与不同的靶标结合具有不同的相互作用，我们可以通过组合分析每个识别元件的比色响应，可以明显的检测不同的靶标。本发明可以简单高效地用于多种蛋白质及男性精液的比色阵列分析，为男性不育症的分析提供检测依据。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111948391A
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN201910416356.6
申请日：2019-05-16
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/574 , G01N33/58 , C08G83/00 , B82Y15/00 , B82Y5/00
Abstract: 本发明公开了一种基于纳米金属有机框架构建新型阵列传感用于结肠癌组织学诊断的方法，为人类肿瘤分类提供了一种新方法，并且为MOF在生物传感中的应用提供了一种新思路。我们选择三种结构稳定的NMOF(Cu-MOF，Fe-MOF和Zr-MOF)，与两个5-TAMRA标记的单链DNA，设计了六个NMOFs-DNA复合物作为识别元件(NP1-NP6)。复合物中DNA的荧光被纳米颗粒淬灭，当样本的组织裂解液与识别元件一起温育时，蛋白质通过多种弱相互作用力与NMOF表面发生相互作用，选择性地置换作为报告探针的DNA分子并产生荧光强度的变化，组成传感阵列，能够有效地识别不同的肿瘤组织。这种方法提供了一种辨别力高、适应性强的替代方案来鉴别结肠癌的肿瘤组织，在医学诊断中具有广泛的发展前景。
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公开(公告)号：CN111443049A
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN201910046219.8
申请日：2019-01-17
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及了一种锆基金属-有机框架和单链DNA修饰金纳米颗粒的比色阵列传感器的制备方法及应用。通过设计了6种不同的单链DNA序列修饰在金纳米颗粒表面，形成独特的传感器识别元件。新型材料锆基金属有机框架通过不同的分子间作用力，可以结合并沉淀单链DNA序列修饰在金纳米颗粒，在某些蛋白质或精液样本的加入后，可以加速或减缓他们的结合力，影响其聚集行为，从而产生可检测的信号。因此，我们可以认为这些识别元件与不同的靶标结合具有不同的相互作用，我们可以通过组合分析每个识别元件的比色响应，可以明显的检测不同的靶标。本发明可以简单高效地用于多种蛋白质及男性精液的比色阵列分析，为男性不育症的分析提供检测依据。
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公开(公告)号：CN117871858A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202210880905.7
申请日：2022-07-25
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/543 , G01N21/78
Abstract: 在本发明中，我们制备了多肽功能化修饰的COFs，并且用其负载酶分子并研发了一种蛋白质的比色分析方法。首先，我们合成了一种具有炔基的COFs纳米颗粒，通过一系列表征实验验证了其成功制备。然后，我们利用偶联剂与活化剂将多肽修饰在COFs表面上，成功制备了多肽功能化COFs探针。随后，我们在COFs表面修饰了辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase，HRP)，HRP的催化活性赋予了COFs探针信号输出和放大的能力，而多肽能够特异性识别并结合靶标蛋白，因此我们所构建的COFs探针能够用于对靶标蛋白的灵敏分析，以富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(Secreted protein acidic and rich in cysteine，SPARC)的定量分析为例，研究表明，我们所提出的方法取得了较好的检测效果，检测限为0.23ng/mL，并且能够应用于复杂样本中SPARC蛋白的检测。
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公开(公告)号：CN112557659B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201910914390.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/574 , G01N33/68 , G01N21/78 , G01N21/31 , C12Q1/682
Abstract: 本发明公开了一种可以定量检测粘蛋白1的无酶多重信号放大生物传感器的构建方法和应用。粘蛋白1(MUC1)的定量分析对于癌症预防和早期诊断具有重要作用。本发明基于链置换反应(SDR)和DNA酶循环扩增，构建了一种检测MUC1的高灵敏信号放大策略。MUC1和适体探针(AP)结合启动链置换反应，释放MUC1/AP复合物用于再循环并在双链产物的两端形成DNA酶。该DNA酶可循环切割底物信号探针(SP)，同时释放G‑四链体序列和新的活性DNA酶序列。这种SDR诱导的多重信号放大体系可产生大量G‑四链体序列，在孵育氯化血红素后可产生显着增强的比色信号以提高灵敏度。该方法可有效区分MUC1与其他干扰蛋白，在临床诊断方面具有巨大潜力。
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公开(公告)号：CN112557659A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN201910914390.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/574 , G01N33/68 , G01N21/78 , G01N21/31 , C12Q1/682
Abstract: 本发明公开了一种可以定量检测粘蛋白1的无酶多重信号放大生物传感器的构建方法和应用。粘蛋白1(MUC1)的定量分析对于癌症预防和早期诊断具有重要作用。本发明基于链置换反应(SDR)和DNA酶循环扩增，构建了一种检测MUC1的高灵敏信号放大策略。MUC1和适体探针(AP)结合启动链置换反应，释放MUC1/AP复合物用于再循环并在双链产物的两端形成DNA酶。该DNA酶可循环切割底物信号探针(SP)，同时释放G‑四链体序列和新的活性DNA酶序列。这种SDR诱导的多重信号放大体系可产生大量G‑四链体序列，在孵育氯化血红素后可产生显着增强的比色信号以提高灵敏度。该方法可有效区分MUC1与其他干扰蛋白，在临床诊断方面具有巨大潜力。
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