公开(公告)号：CN118638796A

公开(公告)日：2024-09-13

申请号：CN202410767808.6

申请日：2024-06-14

Applicant: 南京大学

Inventor： 郭保生 ,  王成智

IPC: C12N15/115 ,  C12N15/10 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了骨关节炎早期生物标志物软骨酸性蛋白靶向适配体及其构建方法，针对预警老年骨性关节炎发生和进展的血清标记物通过配体指数级富集系统进化技术（SELEX）筛选与CRTAC1特异性结合的核酸适配体，通过高通量测序确定序列，并进一步进行生物信息学分析，筛选出与目标蛋白有亲和潜力的序列，从而为开发基于核酸适配体的血清检测试剂盒奠定基础。

公开(公告)号：CN119757759A

公开(公告)日：2025-04-04

申请号：CN202411786067.2

申请日：2024-12-06

Applicant: 南京大学

Inventor： 郭保生 ,  牟静岚 ,  王成智

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/58 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明公开了一种骨关节炎早期诊断试剂盒及其构建方法，包括骨关节炎早期生物标志物软骨酸性蛋白靶向适配体、捕获探针和识别探针，所述适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述捕获探针为生物素修饰的适配体的反向互补链，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述识别探针为生物素修饰的适配体。本发明将辣根过氧化物酶标记的适配体依次与被测样品反应，并将适配体的互补链固定在微孔板上，通过基于酶催化底物的颜色变化快速测定CRTAC1含量。这种顺序反应避免了适配体与cDNA的过度结合，从而确保了对CRTAC1的全覆盖识别；在测定血浆中CRTAC1表现出较高的灵敏度和稳定性，以及良好的加标回收率。

公开(公告)号：CN114404613A

公开(公告)日：2022-04-29

申请号：CN202111532267.1

申请日：2021-12-15

Applicant: 南京大学

Inventor： 郭保生 ,  陈响 ,  张蕾 ,  蒋青

IPC: A61K47/69 ,  A61K47/54 ,  A61K31/506 ,  A61P19/02 ,  A61P29/00 ,  A61P39/06 ,  A61K31/352

Abstract: 本发明公开了骨关节滑膜成纤维细胞靶向适配体纳米粒构建方法及应用，包括以下步骤：S1、分别构建小鼠滑膜成纤维细胞和软骨细胞的培养体系，备用；S2、合成随机核酸适配体文库，其序列如SEQ ID NO.1所示；S3、筛选：以步骤S1构建的滑膜成纤维细胞为正筛细胞，软骨细胞为负筛细胞，采用CELL‑SELEX技术，对步骤S2合成的随机核酸适配体文库经过重复筛选，富集能够特异性结合滑膜成纤维细胞，不结合软骨细胞的核酸适配体CX3，其序列如SEQ ID CX3所示；S4、构建步骤S3筛选出的核酸适配体CX3修饰的脂质体纳米粒。本发明适配体与靶细胞结合力更强，能够实现靶向清除骨性关节炎滑膜中衰老的纤维状滑膜细胞，进而抑制骨性关节炎的发生发展。

公开(公告)号：CN114404613B

公开(公告)日：2023-10-13

申请号：CN202111532267.1

申请日：2021-12-15

Applicant: 南京大学

Inventor： 郭保生 ,  陈响 ,  张蕾 ,  蒋青

IPC: A61K47/69 ,  A61K47/54 ,  A61K31/506 ,  A61P19/02 ,  A61P29/00 ,  A61P39/06 ,  A61K31/352

Abstract: 本发明公开了骨关节滑膜成纤维细胞靶向适配体纳米粒构建方法及应用，包括以下步骤：S1、分别构建小鼠滑膜成纤维细胞和软骨细胞的培养体系，备用；S2、合成随机核酸适配体文库，其序列如SEQ ID NO.1所示；S3、筛选：以步骤S1构建的滑膜成纤维细胞为正筛细胞，软骨细胞为负筛细胞，采用CELL‑SELEX技术，对步骤S2合成的随机核酸适配体文库经过重复筛选，富集能够特异性结合滑膜成纤维细胞，不结合软骨细胞的核酸适配体CX3，其序列如SEQ ID CX3所示；S4、构建步骤S3筛选出的核酸适配体CX3修饰的脂质体纳米粒。本发明适配体与靶细胞结合力更强，能够实现靶向清除骨性关节炎滑膜中衰老的纤维状滑膜细胞，进而抑制骨性关节炎的发生发展。