公开(公告)号：CN110441525A

公开(公告)日：2019-11-12

申请号：CN201810429351.2

申请日：2018-05-02

Applicant: 南京大学

Inventor： 吴洁 ,  鞠熀先 ,  肖庆

IPC: G01N33/68 ,  G01N21/76 ,  G01N33/535 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明涉及一种基于DNA微阵列的蛋白质化学发光成像分析方法。基于不同的目标蛋白质设计其对应的捕获发卡DNA和抗体-DNA。通过自动点样仪将不同的捕获发卡DNA分别点样到玻璃基片上，构建DNA微阵列。以针对不同目标蛋白质的抗体-DNA的混合溶液为检测液，在目标蛋白质存在时，目标蛋白质可以被其相对应的一对抗体-DNA同时夹心识别，使得这对抗体-DNA上的DNA相互靠近进行邻位杂交形成复合物，进而与相对应的捕获发卡DNA杂交，打开其发卡结构。打开的捕获发卡DNA可引发生物素化发卡DNA(H1和H2)发生杂交链反应，在DNA微阵列点上生成长链DNA串联物。最后通过生物素-亲和素特异性反应，将辣根过氧化物酶固定到DNA微阵列上，催化H2O2-鲁米诺反应，产生化学发光信号，通过CCD扫描，实现目标蛋白质的图像分析。该蛋白质分析方法具有多组分、通量高、高灵敏、普适性好等优势，有很好的临床应用价值。