公开(公告)号：CN101037685A

公开(公告)日：2007-09-19

申请号：CN200710020069.0

申请日：2007-02-09

Applicant: 南京大学

Inventor： 田大成 ,  江海洋 ,  唐萍

IPC: C12N15/09 ,  C12N15/11 ,  C12N15/66

Abstract: 天然AFLP接头的方法制备，选择质粒作为载体，利用两个互补的DNA作为引物，且这两个引物序列中有AFLP需要的酶切位点EcoR I/Mse I、Apa I/Taq I酶切位点或其他的酶切位点，通过PCR方法，扩增出具有酶切位点EcoR I和Mse I、Apa I和Taq I的接头核心区域序列，把核心区域序列连入pGEM－T载体，同时在核心区域序列的两翼加上不同的基因DNA片段各构建成一个接头单元序列，然后把不同的接头单元序列通过pBluescript KS载体串联起来，构建为含有多拷贝接头DNA的载体，再导入大肠杆菌内天然扩增接头，最后利用EcoR I和Mse I、Apa I和TaqI酶切出接头序列，得到AFLP接头DNA。

公开(公告)号：CN101037685B

公开(公告)日：2010-05-19

申请号：CN200710020069.0

申请日：2007-02-09

Applicant: 南京大学

Inventor： 田大成 ,  江海洋 ,  唐萍

IPC: C12N15/09 ,  C12N15/11 ,  C12N15/66

Abstract: 天然AFLP接头的方法制备，选择质粒作为载体，利用两个互补的DNA作为引物，且这两个引物序列中有AFLP需要的酶切位点EcoR I/Mse I、Apa I/Taq I酶切位点或其他的酶切位点，通过PCR方法，扩增出具有酶切位点EcoR I和Mse I、Apa I和Taq I的接头核心区域序列，把核心区域序列连入pGEM-T载体，同时在核心区域序列的两翼加上不同的基因DNA片段各构建成一个接头单元序列，然后把不同的接头单元序列通过pBluescript KS载体串联起来，构建为含有多拷贝接头DNA的载体，再导入大肠杆菌内天然扩增接头，最后利用EcoR I和Mse I、Apa I和TaqI酶切出接头序列，得到AFLP接头DNA。