公开(公告)号：CN118652935A

公开(公告)日：2024-09-17

申请号：CN202410944031.6

申请日：2024-07-15

Applicant: 南京医科大学

Inventor： 周婷婷 ,  林凡 ,  于瀚阳 ,  吴若脩 ,  刘越 ,  王若彤 ,  秦千雅

IPC: C12N15/867 ,  A01K67/0276 ,  G01N21/64 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明公开了一种新的可示踪小鼠自发脑胶质瘤原位模型的构建方法，同时敲除小鼠室管膜下区细胞中的抑癌基因PTEN、TP53和NF1。具体是将装载sgPTEN、sgTP53、sgNF1和Lucifrease‑GFP的质粒包装成慢病毒；将LOX‑CRE条件表达Cas9的小鼠剪开头皮暴露Bregma，将注射针固定在针架上并移动直到针尖对准Bregma十字点，此时X、Y、Z轴调零；在X＝2.0mm，Y＝1mm处对小鼠颅骨形成注射孔；注射针吸取病毒悬液后调节Z＝2.5mm向下进针；再返回至Z＝2mm处以1μl/min速度注射病毒，注射完停留1min后缓慢拔针；注射病毒后一个月对小鼠小鼠脑部显像观察，对所构建的可示踪小鼠自发脑胶质瘤原位模型进行评估。本发明采用更接近脑胶质瘤自然发病的过程构建动物模型，有效模拟了脑胶质瘤的发生以及肿瘤与微环境共进化带来的复杂性和异质性。