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公开(公告)号:CN117143872A
公开(公告)日:2023-12-01
申请号:CN202310903394.0
申请日:2023-07-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于抑制根结线虫病的RNAi靶标基因及其应用,属于生物技术及农业应用领域,该RNAi的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,其获得步骤如下:(1)提取南方根结线虫的总RNA,通过反转录操作获得cDNA;(2)以步骤(1)中得到的cDNA作为模板,以SEQ ID No.1与SEQ ID No.2所示序列作为引物,通过PCR扩增得到MiMSP30全长序列;(3)以MiMSP30的全长序列作为模板,以SEQ ID No.4与SEQ ID No.5所示序列、或SEQ ID No.6与SEQ ID No.7所示序列分别作为引物,通过PCR反应扩增得到可作为dsRNA正、反链合成模板的DNA序列。对根结线虫游离2龄幼虫饲喂dsRNA‑MSP30的MiMSP30沉默效率达70.02%,根结线虫的侵染虫口数显著下降,根内发育进程出现明显滞后,根结与卵块数均显著减少。