公开(公告)号：CN117144032A

公开(公告)日：2023-12-01

申请号：CN202310295579.8

申请日：2023-03-24

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 蒋春号 ,  董文盼 ,  许配玲 ,  杨纪潇

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种基于HNB指示剂的西瓜枯萎病菌的LAMP检测技术，属于西瓜枯萎病菌分子检测技术领域；本发明通过筛选西瓜枯萎病菌基因组的特异性片段，利用在线软件设计LAMP引物，并进行灵敏度和特异性筛选，最终得到一组灵敏度和特异性强的引物，之后对最佳反应条件进行摸索，为西瓜枯萎病菌的田间快速检测提供技术支持。

公开(公告)号：CN117143872A

公开(公告)日：2023-12-01

申请号：CN202310903394.0

申请日：2023-07-22

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 蒋春号 ,  范志航 ,  许配玲 ,  杨纪潇

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00 ,  A01N57/16 ,  A01P5/00

Abstract: 本发明公开了一种用于抑制根结线虫病的RNAi靶标基因及其应用，属于生物技术及农业应用领域，该RNAi的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，其获得步骤如下：(1)提取南方根结线虫的总RNA，通过反转录操作获得cDNA；(2)以步骤(1)中得到的cDNA作为模板，以SEQ ID No.1与SEQ ID No.2所示序列作为引物，通过PCR扩增得到MiMSP30全长序列；(3)以MiMSP30的全长序列作为模板，以SEQ ID No.4与SEQ ID No.5所示序列、或SEQ ID No.6与SEQ ID No.7所示序列分别作为引物，通过PCR反应扩增得到可作为dsRNA正、反链合成模板的DNA序列。对根结线虫游离2龄幼虫饲喂dsRNA‑MSP30的MiMSP30沉默效率达70.02％，根结线虫的侵染虫口数显著下降，根内发育进程出现明显滞后，根结与卵块数均显著减少。

公开(公告)号：CN116287406A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310295351.9

申请日：2023-03-24

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 蒋春号 ,  董文盼 ,  许配玲 ,  杨纪潇

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种快速检测西瓜枯萎病菌的RPA检测方法，涉及植物保护技术领域，该方法以尖孢镰刀菌西瓜专化型的特异性DNA片段为靶标，设计RPA引物，通过灵敏度和特异性筛选最终得到一组灵敏度和特异性强的引物，该引物对西瓜枯萎病菌FON的检测下限为1ng/μL。利用筛选到的RPA引物和探针建立了西瓜枯萎病菌的快速可视化检测方法，整个检测过程只需要在38℃水浴锅中反应12min，将反应产物稀释20倍，取50μL上样，5min即可通过侧流层析试纸条观察结果，操作简单，不需要复杂的仪器设备，可为田间检测西瓜枯萎病菌提供技术支持。