公开(公告)号：CN118546940A

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202410786566.5

申请日：2024-06-18

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 马喆 ,  田兴雨 ,  夏霖亚 ,  范红结

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/47 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K16/18 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种猪C反应蛋白及单克隆抗体的编码基因序列及应用。通过对序列进行优化，人工合成猪C反应蛋白基因，将合成基因插入pET‑28a载体，然后和伴侣蛋白质粒pTF16共转入BL21(DE3)宿主菌中，使猪C反应蛋白和伴侣蛋白tig共表达，以促进猪C反应蛋白的可溶性表达；通过该重组蛋白免疫并获得一株杂交瘤细胞，分泌单克隆抗体含有名为VH重链可变区及VL轻链可变区，且由互补决定区CDR1、CDR2、CDR3和框架区由组成。实验证明，经过重组表达的猪C反应蛋白具有高度特异性，通过重组蛋白制备并筛选获得产生的单克隆抗体可用于蛋白检测试剂盒。本发明的猪C反应蛋白ELISA检测试剂盒用于检测猪C反应蛋白，可有效检测猪群血清C反应蛋白浓度，检测群体炎症水平，评估猪场猪群健康水平。