公开(公告)号：CN111235310A

公开(公告)日：2020-06-05

申请号：CN202010104738.8

申请日：2020-02-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  潘中洲 ,  陆佳萱 ,  张骋 ,  赵雯 ,  何婉婷 ,  王茹怡 ,  翟晓凤

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种猪病毒性腹泻病病原的四重Taqman荧光定量PCR检测方法（荧光定量聚合酶链式反应，qPCR，又称real-time PCR）。具体地，针对猪德尔塔冠状病毒、猪凸隆病毒、猪流行性腹泻病毒和猪急性腹泻综合征冠状病毒，设计了四对特异性引物和TaqMan探针，实现了在一个PCR反应管中同时检测四种能够引起猪群腹泻的病毒，且其检测灵敏度达到初始模板浓度为每微升1×102个拷贝（1×102 copies·μL-1），并具有极佳的特异性和重复性，可以直接应用到临床样品检测中。

公开(公告)号：CN111763766B

公开(公告)日：2022-12-27

申请号：CN202010290281.4

申请日：2020-04-14

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  王茹怡 ,  张文艳 ,  潘中洲 ,  李改茹

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本申请公开一步法检测犬腹泻病毒的引物对、TaqMan探针及方法与应用，从引物探针的特异性、反应体系的关键因子、质控构建等多个方面对多重荧光PCR进行了探索研究，以待检样品的核酸或反转录产物扩增检测片段并连接pMD18‑T载体，成功构建质粒作为模板，建立了犬细小病毒，犬冠状病毒，犬星状病毒，犬库布病毒多重实时荧光定量PCR方法，该专利允许在一个反应管中最多同时检测出4种能够导致犬腹泻的病毒，其检测灵敏度达到1×102个拷贝明显提高了四种犬腹泻病毒检测的灵敏性和特异性，而且有效的缩短了其检测周期，具有重要意义。

公开(公告)号：CN111763766A

公开(公告)日：2020-10-13

申请号：CN202010290281.4

申请日：2020-04-14

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  王茹怡 ,  张文艳 ,  潘中洲 ,  李改茹

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本申请公开一步法检测犬腹泻病毒的引物对、TaqMan探针及方法与应用，从引物探针的特异性、反应体系的关键因子、质控构建等多个方面对多重荧光PCR进行了探索研究，以待检样品的核酸或反转录产物扩增检测片段并连接pMD18-T载体，成功构建质粒作为模板，建立了犬细小病毒，犬冠状病毒，犬星状病毒，犬库布病毒多重实时荧光定量PCR方法，该专利允许在一个反应管中最多同时检测出4种能够导致犬腹泻的病毒，其检测灵敏度达到1×102个拷贝明显提高了四种犬腹泻病毒检测的灵敏性和特异性，而且有效的缩短了其检测周期，具有重要意义。