猪病毒性腹泻病病原的五重RT-PCR检测方法

    公开(公告)号:CN110512027B

    公开(公告)日:2022-04-01

    申请号:CN201910794842.1

    申请日:2019-08-27

    Abstract: 本申请公开了猪病毒性腹泻病病原的五重RT‑PCR检测方法,其中5对引物分别为猪德尔塔冠状病毒(又名猪丁型冠状病毒)的检测引物、猪凸隆病毒的检测引物、猪流行性腹泻病毒的检测引物、猪急性腹泻综合征冠状病毒的检测引物、传染性胃肠炎病毒的检测引物。以待检样品的核酸或反转录产物作为模板,采用2×Taq Plus Master Mix,使用本申请中的5对引物对进行PCR扩增。该专利允许在一个PCR反应管中最多同时检测出5种能够导致猪群腹泻的病毒,其检测灵敏度达到初始模板浓度为每微升1×103个拷贝(1×103 copies/μL),并具有极佳的特异性和重复性,可以直接应用到临床样品检测中。

    一步法检测犬腹泻病毒的引物对、TaqMan探针及方法与应用

    公开(公告)号:CN111763766B

    公开(公告)日:2022-12-27

    申请号:CN202010290281.4

    申请日:2020-04-14

    Abstract: 本申请公开一步法检测犬腹泻病毒的引物对、TaqMan探针及方法与应用,从引物探针的特异性、反应体系的关键因子、质控构建等多个方面对多重荧光PCR进行了探索研究,以待检样品的核酸或反转录产物扩增检测片段并连接pMD18‑T载体,成功构建质粒作为模板,建立了犬细小病毒,犬冠状病毒,犬星状病毒,犬库布病毒多重实时荧光定量PCR方法,该专利允许在一个反应管中最多同时检测出4种能够导致犬腹泻的病毒,其检测灵敏度达到1×102个拷贝明显提高了四种犬腹泻病毒检测的灵敏性和特异性,而且有效的缩短了其检测周期,具有重要意义。

    一步法检测犬腹泻病毒的引物对、TaqMan探针及方法与应用

    公开(公告)号:CN111763766A

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN202010290281.4

    申请日:2020-04-14

    Abstract: 本申请公开一步法检测犬腹泻病毒的引物对、TaqMan探针及方法与应用,从引物探针的特异性、反应体系的关键因子、质控构建等多个方面对多重荧光PCR进行了探索研究,以待检样品的核酸或反转录产物扩增检测片段并连接pMD18-T载体,成功构建质粒作为模板,建立了犬细小病毒,犬冠状病毒,犬星状病毒,犬库布病毒多重实时荧光定量PCR方法,该专利允许在一个反应管中最多同时检测出4种能够导致犬腹泻的病毒,其检测灵敏度达到1×102个拷贝明显提高了四种犬腹泻病毒检测的灵敏性和特异性,而且有效的缩短了其检测周期,具有重要意义。

    猪病毒性腹泻病病原的五重RT-PCR检测方法

    公开(公告)号:CN110512027A

    公开(公告)日:2019-11-29

    申请号:CN201910794842.1

    申请日:2019-08-27

    Abstract: 本申请公开了猪病毒性腹泻病病原的五重RT-PCR检测方法,其中5对引物分别为猪德尔塔冠状病毒(又名猪丁型冠状病毒)的检测引物、猪凸隆病毒的检测引物、猪流行性腹泻病毒的检测引物、猪急性腹泻综合征冠状病毒的检测引物、传染性胃肠炎病毒的检测引物。以待检样品的核酸或反转录产物作为模板,采用2×Taq Plus Master Mix,使用本申请中的5对引物对进行PCR扩增。该专利允许在一个PCR反应管中最多同时检测出5种能够导致猪群腹泻的病毒,其检测灵敏度达到初始模板浓度为每微升1×103个拷贝(1×103 copies/μL),并具有极佳的特异性和重复性,可以直接应用到临床样品检测中。

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