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公开(公告)号：CN114736851B
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202210105570.1
申请日：2022-01-28
Applicant: 南京周子未来食品科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 为解决成脂干细胞培养的常规支架的弊端以及现有培养肉风味、营养、口感、多汁性等方面的缺陷，本发明提供植物拉丝蛋白在作为成脂干细胞体外培养支架中的应用以及一种植物基脂肪培养肉的制备方法，具体包括S1：植物拉丝蛋白支架预处理：将植物拉丝蛋白吸水膨胀后，切成合适的大小，烘干，灭菌，在无菌条件下将植物拉丝蛋白支架用生长培养基浸泡过夜；S2：将成脂干细胞加入生长培养基，制成细胞悬液后接种到植物拉丝蛋白支架上，进行增殖培养；S3：增殖培养至细胞在支架上覆盖率达到80％‑90％时，进行诱导分化培养，直至分化为脂肪细胞，最终制备成一种具有动物肉风味的植物基脂肪培养肉。
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公开(公告)号：CN109182538B
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN201811146231.8
申请日：2018-09-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs88640083及2b‑RAD基因分型和分析方法，包括如下步骤：建库测序；生物信息学分析：数据过滤、酶切序列提取、数据比对、SNP分型、全基因组关联分析。采用BayesA模型和Logistic回归模型对奶牛临床乳腺炎表型性状进行全基因组关联分析（GWAS）。相对于现有技术，本发明的有益效果为：相对于RADseq，2b‑RAD测序技术具有以下几点优点：1、酶切片段长短均一，不需要后续筛选；2、酶切片段不需要添加“Y”型接头；3、步骤简单；4、每个样本测序成本低；5、测序耗时短。本发明还构建两种全基因组关联分析模型（BayesA和Logistics）；3、筛选到一个中国荷斯坦奶牛乳腺炎关键SNPs位点及对应基因（SYK）。
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公开(公告)号：CN103773733B
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201310665450.8
申请日：2013-12-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种哺乳动物肌内脂肪细胞和骨骼肌细胞分层共培养方法。采取屠宰后动物背最长肌组织，冲洗剪碎后Ⅰ型胶原酶消化，消化后的混和液过筛；收集滤液，离心，分别收集上层成熟脂肪细胞液和下层肌细胞，分别加适量无血清培养基稀释洗涤，离心；取上层离心液和下层肌细胞液加入25cm2培养瓶中，在37℃、5%CO2培养箱中培养。成熟脂肪细胞由于浮力小将漂浮贴壁到上层“天花板”面，而肌细胞下沉到培养瓶底面生长。该细胞培养模型可以将动物同一肌肉组织的肌内脂肪细胞和肌细胞在同一培养液中分层并共培养，从而为研究成熟脂肪细胞分泌物对肌细胞分化的影响或肌细胞和脂肪细胞的相互作用提供新的体外细胞研究模型。
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公开(公告)号：CN109182505B
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN201811146220.X
申请日：2018-09-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6883 , C12N15/11 , G16B30/00 , G16B40/00 , G16B50/00
Abstract: 本发明涉及奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs75762330及2b‑RAD基因分型和分析方法，包括如下步骤：建库测序；生物信息学分析：数据过滤、酶切序列提取、数据比对、SNP分型、全基因组关联分析。采用BayesA模型和Logistic回归模型对奶牛临床乳腺炎表型性状进行全基因组关联分析（GWAS）。相对于现有技术，本发明的有益效果为：相对于RADseq，2b‑RAD测序技术具有以下几点优点：1、酶切片段长短均一，不需要后续筛选；2、酶切片段不需要添加“Y”型接头；3、步骤简单；4、每个样本测序成本低；5、测序耗时短。本发明还构建两种全基因组关联分析模型（BayesA和Logistics）；3、筛选到一个中国荷斯坦奶牛乳腺炎关键SNPs位点及对应基因（PTK2B）。
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公开(公告)号：CN109182504A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811145695.7
申请日：2018-09-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs20438858及2b-RAD基因分型和分析方法，包括如下步骤：建库测序；生物信息学分析：数据过滤、酶切序列提取、数据比对、SNP分型、全基因组关联分析。采用BayesA模型和Logistic回归模型对奶牛临床乳腺炎表型性状进行全基因组关联分析（GWAS）。相对于现有技术，本发明的有益效果为：相对于RADseq，2b-RAD测序技术具有以下几点优点：1、酶切片段长短均一，不需要后续筛选；2、酶切片段不需要添加“Y”型接头；3、步骤简单；4、每个样本测序成本低；5、测序耗时短。本发明还构建两种全基因组关联分析模型（BayesA和Logistics）；3、筛选到一个中国荷斯坦奶牛乳腺炎关键SNPs位点及对应基因（TNFRSF21）。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103773733A
公开(公告)日：2014-05-07
申请号：CN201310665450.8
申请日：2013-12-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种哺乳动物肌内脂肪细胞和骨骼肌细胞分层共培养方法。采取屠宰后动物背最长肌组织，冲洗剪碎后Ⅰ型胶原酶消化，消化后的混和液过筛；收集滤液，离心，分别收集上层成熟脂肪细胞液和下层肌细胞，分别加适量无血清培养基稀释洗涤，离心；取上层离心液和下层肌细胞液加入25cm2培养瓶中，在37℃、5%CO2培养箱中培养。成熟脂肪细胞由于浮力小将漂浮贴壁到上层“天花板”面，而肌细胞下沉到培养瓶底面生长。该细胞培养模型可以将动物同一肌肉组织的肌内脂肪细胞和肌细胞在同一培养液中分层并共培养，从而为研究成熟脂肪细胞分泌物对肌细胞分化的影响或肌细胞和脂肪细胞的相互作用提供新的体外细胞研究模型。
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公开(公告)号：CN112553154A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011550577.1
申请日：2020-12-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明提供一种用于培养肉种子细胞体外扩大培养的改良培养基，即脂肪间充质干细胞的体外扩大培养的改良培养基。改良后的培养基为添加bFGF的生长培养基，采用此改良培养基培养15天获得的细胞总数是对照生长培养基中获得的细胞总数的6倍，并且更为重要的是，脂肪间充质干细胞在体外大量扩增，达到需要的细胞数量之后，仍能保持较高的分化能力。因此，改良培养基有助于在体外获得大量具有功能性的脂肪间充质干细胞，较好地满足培养肉生产对种子细胞的数量和干细胞功能的需求。
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公开(公告)号：CN111820326A
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN201910304447.0
申请日：2019-04-16
Applicant: 南京农业大学
IPC: A23K50/10 , A23K10/18 , A23K20/158 , A23K20/142 , A23K20/174 , A23K20/24 , A23K20/163
Abstract: 本发明涉及一种在南方湿热环境下育肥期肉牛抗热应激饲料添加剂，包含反刍专用酵母8～10％；过瘤胃脂肪粉35～45％；过瘤胃γ-氨基丁酸3～5％；包被VC4～6％；氧化镁20～25％；氯化钾10～18％；糖精钠2.5～4％。该饲料添加剂按牛每日总采食TMR饲料量的1.5％添加。此添加剂每日与牛场原TMR日粮混合搅拌均匀后分两次饲喂牛只。本发明通过酵母产物调节牛瘤胃发酵并促进饲料的消化；γ-氨基丁酸、VC、氧化镁和氯化钾均具有调节体温、抗应激及增加免疫力的功效；脂肪粉可以促使肉牛育肥期快速沉积脂肪；钾、镁同补比单一添加氯化钾抗热应激效果更好。本发明制得的饲料添加剂能够显著预防夏季高温季节肥育肉牛热应激的发生，提高牛只日增重、末重及降低料重比，取得了良好的饲养效果。
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公开(公告)号：CN109182505A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811146220.X
申请日：2018-09-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6883 , C12N15/11 , G16B30/00 , G16B40/00 , G16B50/00
Abstract: 本发明涉及奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs75762330及2b-RAD基因分型和分析方法，包括如下步骤：建库测序；生物信息学分析：数据过滤、酶切序列提取、数据比对、SNP分型、全基因组关联分析。采用BayesA模型和Logistic回归模型对奶牛临床乳腺炎表型性状进行全基因组关联分析（GWAS）。相对于现有技术，本发明的有益效果为：相对于RADseq，2b-RAD测序技术具有以下几点优点：1、酶切片段长短均一，不需要后续筛选；2、酶切片段不需要添加“Y”型接头；3、步骤简单；4、每个样本测序成本低；5、测序耗时短。本发明还构建两种全基因组关联分析模型（BayesA和Logistics）；3、筛选到一个中国荷斯坦奶牛乳腺炎关键SNPs位点及对应基因（PTK2B）。
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公开(公告)号：CN114990056B
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202210695711.X
申请日：2022-06-20
Applicant: 南京周子未来食品科技有限公司 , 南京农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种高纯度猪脂肪祖细胞的分离纯化方法，包括如下步骤：采集猪脂肪组织，漂洗，消化，得到含有猪脂肪祖细胞的单核细胞悬液；取含有脂肪祖细胞的单核细胞悬液，离心、细胞筛过滤、裂解、贴壁培养，取贴壁细胞即为含有猪脂肪祖细胞的单核细胞群；将猪脂肪祖细胞的单核细胞群进行流式分选，先选取出CD31和CD45阴性的细胞，再从前述细胞中选取出CD29和CD140a阳性的细胞，即为纯化后的猪脂肪祖细胞。应用本发明的纯化方法，可以稳定的获得高纯度的猪脂肪祖细胞。分离得到的猪脂肪祖细胞具有高效的分化效率。应用本发明的方法，可以为培养脂肪研究和实际生产提供大量的种子细胞来源。
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