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公开(公告)号：CN104561079A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201510017612.6
申请日：2015-01-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于猪链球菌病防控技术研究领域，提供pVAX-PTX3真核表达载体、构建方法及所表达的PTX3蛋白对猪链球菌2型的抗菌应用。重组真核表达载体pVAX-PTX3中PTX3蛋白基因ptx3序列如SEQ ID NO.1所示，可在组织体内稳定表达PTX3蛋白。PTX3蛋白序列如SEQ ID NO.2所示，用于制备治疗或预防由猪链球菌2型引起的猪链球菌病生物制剂。pVAX-PTX3重组质粒稳定性强，可在组织体内稳定有效表达，表达产生的PTX3蛋白对猪链球菌2型有抗菌作用；通过体外试验，BALB/c小鼠和仔猪的体内试验验证了pVAX-PTX3表达的PTX3蛋白对猪链球菌2型的抗菌作用，pVAX-PTX3建立起临床猪链球菌病的预防和治疗的新方法。
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公开(公告)号：CN101942505A
公开(公告)日：2011-01-12
申请号：CN201010158115.5
申请日：2010-04-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种致病性嗜水气单胞菌检测试剂盒，属于病原微生物检测领域。基于致病性嗜水气单胞菌标准株J-1株16S rDNA基因组的高度保守区间所设计的引物用于致病性嗜水气单胞菌种属特性的区别鉴定，扩增片段685bp；以该菌所分泌的特异性蛋白酶气溶素所设计的第二对引物用于气单胞菌的致病性的判定，片段大小为301bp。本发明能够快速、准确的判定待检菌株的种属特性和致病性，通过对实验菌株和临床分离株的常规生化鉴定方法和致病性鉴定方法的比较试验得知，该试剂盒的符合率为100％。在对本试剂盒的特异性、重复性、敏感性和保存期的评价试验中，均得到了理想的结果。
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公开(公告)号：CN101798573A
公开(公告)日：2010-08-11
申请号：CN201010125025.6
申请日：2010-03-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及利用全基因合成技术获得犬α干扰素基因及进行干扰素蛋白的原核表达，属于生物制药领域。包括对犬α干扰素基因序列进行密码子的改造并全基因合成此序列，含犬α干扰素基因的原核表达载体的构建，用所述含犬α干扰素基因的原核表达载体转化大肠杆菌及诱导表达，蛋白提取及变性复性，及抗病毒活性的研究。试验所得干扰素能抵抗水疱性口炎病毒的攻击，比活性达到1.67×107U/mg。该方法生产干扰素工艺简单，表达量高，生物活性高。
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公开(公告)号：CN118255852B
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202410182539.7
申请日：2024-02-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/315 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/09 , A61K39/385 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种具有多血清型保护性的猪链球菌多表位抗原，所述猪链球菌多表位抗原MEAS的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了含有所述猪链球菌多表位抗原的猪链球菌亚单位疫苗。本发明中的多表位抗原可激活小鼠体内的细胞免疫与体液免疫应答，免疫小鼠后能达到较高的抗体水平，并具有较强的调理吞噬能力。MEAS还可为小鼠提供多血清型的保护效果，显著降低猪链球菌在小鼠各脏器的细菌载量，调节体内炎性细胞因子表达水平。因此，MEAS可作为猪链球菌亚单位疫苗的候选，其易于表达纯化，产量高，并可刺激机体产生保护性抗体以抵抗多种血清型的猪链球菌感染，有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN118255852A
公开(公告)日：2024-06-28
申请号：CN202410182539.7
申请日：2024-02-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/315 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/09 , A61K39/385 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种具有多血清型保护性的猪链球菌多表位抗原，所述猪链球菌多表位抗原MEAS的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了含有所述猪链球菌多表位抗原的猪链球菌亚单位疫苗。本发明中的多表位抗原可激活小鼠体内的细胞免疫与体液免疫应答，免疫小鼠后能达到较高的抗体水平，并具有较强的调理吞噬能力。MEAS还可为小鼠提供多血清型的保护效果，显著降低猪链球菌在小鼠各脏器的细菌载量，调节体内炎性细胞因子表达水平。因此，MEAS可作为猪链球菌亚单位疫苗的候选，其易于表达纯化，产量高，并可刺激机体产生保护性抗体以抵抗多种血清型的猪链球菌感染，有良好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113215310B
公开(公告)日：2024-06-11
申请号：CN202110369237.7
申请日：2021-04-06
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种通过荧光定量PCR快速检测犬细小病毒的方法，属于分子检测技术领域。为了克服现有检测方法敏感性不够高的技术不足，本发明提供一种通过荧光定量PCR快速检测犬细小病毒的方法。本发明利用提取试剂盒提取样品DNA后，通过设计特异性引物，利用普通PCR技术对CPV编码基因进行分片段扩增，然后对目标片段进行荧光定量PCR扩增检测，从而可以在DNA水平上检测和诊断犬细小病毒。该方法操作简单，结果直观，对于调查CPV的流行情况并针对性建立有效的疫病防控措施有重要意义。
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公开(公告)号：CN117965592B
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202410119509.1
申请日：2024-01-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌菌蜕及其制备方法和应用，所述猪链球菌菌蜕的制备方法包括以下步骤：将包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的四环素诱导调控系统和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的猪链球菌细胞壁穿孔酶Crfp的质粒转入猪链球菌中后培养，由无水四环素诱导Crfp表达后，制得所述猪链球菌菌蜕。经试验验证，添加无水四环素可诱导CrfP表达而产生猪链球菌菌蜕，额外添加穿透肽WR12可促进菌蜕的产率，并实现对猪链球菌的完全灭活。利用本发明制备菌蜕，技术工艺简单，整个过程不添加任何化学灭活的试剂，充分保留表面抗原活性，免疫原性强，为制备猪链球菌菌蜕疫苗奠定基础。
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公开(公告)号：CN115058397A
公开(公告)日：2022-09-16
申请号：CN202210114436.8
申请日：2022-01-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 一种牛肠道病毒分离株及其应用，该病毒的分类命名为牛肠道病毒bovine enterovirus（BEV），该病毒已于2020年7月17日在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)进行的保藏，保藏编号为CCTCC NO:V202028。本发明中的病毒HB1901可在MDBK细胞中高效增殖，病毒浓度可达106.0TCID50/mL，无外源病毒污染；所构建的感染性克隆质粒可直接转染至真核细胞中，无需转录成RNA后再转染，操作简便，成本低廉；携带外源绿色荧光蛋白GFP，并可在细胞中稳定表达。
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公开(公告)号：CN110669849A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201910907271.8
申请日：2019-09-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种无乳链球菌的检测试剂盒及其检测方法。该试剂盒包括用于稀释奶液样品的无菌生理盐水、用于菌体裂解的裂解缓冲液，该试剂盒还包括：用于将溶液中残余的乳蛋白和脂类物质溶解在溶液中的洗涤液，用于吸附在分散的二氧化硅的载体上的核酸脱离在溶液中的洗脱液，以及，吸附体系；其中，所述吸附体系为重悬有包埋性单分散二氧化硅磁性微球的裂解缓冲液。本发明通过上述检测试剂盒提取含有待检生物材料的核酸，再通过PCR检测反应体系对上述核酸进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳观察，当220bp处出现条带则判定为阳性样。本发明能直接从奶液中提取无乳链球菌的核酸，检测效率更高、假阳性率也更低。
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公开(公告)号：CN101928711A
公开(公告)日：2010-12-29
申请号：CN201010125002.5
申请日：2010-03-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及利用全基因合成技术获得鸡α干扰素基因及进行干扰素蛋白的原核表达，属于生物制药领域。包括对鸡α干扰素基因序列进行密码子的改造并全基因合成此序列，含鸡α干扰素基因的原核表达载体的构建，用所述含鸡α干扰素基因的原核表达载体转化大肠杆菌及诱导表达，蛋白提取及变性复性，及抗病毒活性的研究。试验所得干扰素能抵抗水疱性口炎病毒的攻击，比活性达到1.06×105U/mg。该方法生产干扰素工艺简单，表达量高，生物活性高。
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