公开(公告)号：CN112080517A

公开(公告)日：2020-12-15

申请号：CN202010934721.5

申请日：2020-09-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 和玉兵 ,  占华东

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/64 ,  A01H6/46 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及一种提高获得基因编辑植株概率的方法及其应用。本发明将一个新的可见光下裸眼可视报告系统的表达盒与基因编辑系统的表达盒连锁到一个载体上，对植物进行遗传转化。因为与基因编辑系统发生连锁的报告系统能在植物体内产生红色的甜菜红素，且基因编辑表达盒在植物细胞中成功表达是植物被编辑的前提，所以可以直接通过甜菜红素的产生来指示基因编辑表达盒正常表达，从而直接通过可见光下裸眼可视植物体的颜色来挑选发生基因编辑的植株。本发明有效避免了通过抗生素筛选获得的植株中存在部分植株未发生靶位点编辑的情况，成功实现通过甜菜红素报告系统高效获得靶位点被编辑的植株。

公开(公告)号：CN112899303A

公开(公告)日：2021-06-04

申请号：CN202110171762.8

申请日：2021-02-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 和玉兵 ,  占华东

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/55 ,  A01H5/10 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明属于植物基因工程领域，涉及一种利用胚乳特异性自杀获得非转基因的定向基因突变植株的方法及其应用，本发明利用能驱动基因胚乳特异表达的启动子驱动毒蛋白，开发了一种快速高效获得非转基因的定向基因突变植株的方法(简称TEKE系统，转基因植物胚乳自杀的基因编辑)，步骤为：a)构建一个用于对植物进行遗传转化的构建体，其含有第一核酸分子和第二核酸分子，其中第一核酸分子为基因编辑元件；第二核酸分子为胚乳致死或停止发育元件。b)将需要处理的植株通过引入外源核酸分子实施转基因。该系统能够自主消除转基因后代中含有转基因成分的种子，可用于简便快捷获得不含转基因片段的定点突变植株。

公开(公告)号：CN119709844A

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202411986852.2

申请日：2024-12-31

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘峰 ,  占华东 ,  鲍依群 ,  段天奇 ,  李梓欣

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明涉及水稻基因工程领域，特别是水稻基因OsbHLH176在调控耐冷性中的应用。本发明利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术对核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的水稻基因OsbHLH176进行编辑，敲除水稻基因OsbHLH176的表达，进而获得冷敏感的水稻突变体。并利用pC1390U载体构建OsbHLH176过表达材料。实验结果表明，与野生型水稻相比，OsbHLH176过表达突变体的耐冷性明显提高，而OsbHLH176敲除突变体的耐冷性减弱，提示该基因在耐冷性途径中的正调控因子。本发明提供了一种改良水稻耐冷性的策略，为提高水稻在寒冷环境中的适应性及农业生产提供理论依据和实践指导。

公开(公告)号：CN119708185A

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202411986842.9

申请日：2024-12-31

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘峰 ,  占华东 ,  鲍依群 ,  段天奇 ,  李梓欣

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及控制水稻耐冷性的基因OsbHLH178及其应用。该基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示，编码的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：2所示。本发明利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术对水稻OsbHLH178基因进行编辑，沉默其编码蛋白的表达，获得冷敏感水稻突变体。将OsbHLH178CDS克隆至pC1390U载体中，构建过表达载体。在冷胁迫下，突变体的存活率低于野生型，而过表达转基因水稻的存活率高于野生型，表明OsbHLH178基因在调节水稻耐冷性方面发挥重要作用。本发明为植物及水稻抗寒育种提供了新的资源。

公开(公告)号：CN119661673A

公开(公告)日：2025-03-21

申请号：CN202411986859.4

申请日：2024-12-31

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘峰 ,  占华东 ,  鲍依群 ,  段天奇 ,  李梓欣

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及水稻耐冷性负调控基因OsbHLH090及其应用。该基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示，编码的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：2所示。本发明利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术对水稻OsbHLH090基因进行编辑，敲除该基因获得冷敏感水稻突变体。将OsbHLH090CDS克隆至pC1390U载体中，构建过表达载体。在冷胁迫下，突变体的存活率高于野生型，而过表达转基因水稻的存活率低于野生型，表明OsbHLH090基因是水稻耐冷途径中重要的负调控因子。本发明为植物及水稻抗寒育种提供了新的资源。