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公开(公告)号：CN110713962A
公开(公告)日：2020-01-21
申请号：CN201910845556.3
申请日：2019-09-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一株高产丙二酰辅酶A的基因工程菌及其构建方法和应用，所述基因工程菌由敲除大肠杆菌基因组中ldhA、pta、frdA、poxB、adhE五个基因，再导入丙二酰辅酶A合成途径基因，包括大肠杆菌的乙酰辅酶A合成酶基因，肠沙门氏菌的乙酰辅酶A羧化酶基因和谷氨酸棒状杆菌的生物素连接酶基因构建而成。本发明基因工程菌通过对工程菌内部乙酰辅酶A流出途径进行抑制，并将丙二酰辅酶A合成途径构建到不同的表达载体转入工程菌，实现丙二酰辅酶A的高效积累，该工程菌可以以大肠杆菌的代谢副产物乙酸为底物，高效合成黄酮类化合物的前体物质丙二酰辅酶A，并利用该菌提高微生物法合成黄酮类化合物骨架前体物质柚皮素的产量。
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公开(公告)号：CN110713962B
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN201910845556.3
申请日：2019-09-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一株高产丙二酰辅酶A的基因工程菌及其构建方法和应用，所述基因工程菌由敲除大肠杆菌基因组中ldhA、pta、frdA、poxB、adhE五个基因，再导入丙二酰辅酶A合成途径基因，包括大肠杆菌的乙酰辅酶A合成酶基因，肠沙门氏菌的乙酰辅酶A羧化酶基因和谷氨酸棒状杆菌的生物素连接酶基因构建而成。本发明基因工程菌通过对工程菌内部乙酰辅酶A流出途径进行抑制，并将丙二酰辅酶A合成途径构建到不同的表达载体转入工程菌，实现丙二酰辅酶A的高效积累，该工程菌可以以大肠杆菌的代谢副产物乙酸为底物，高效合成黄酮类化合物的前体物质丙二酰辅酶A，并利用该菌提高微生物法合成黄酮类化合物骨架前体物质柚皮素的产量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112391396B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202011082793.8
申请日：2020-10-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种构建于大肠杆菌中的粪肠球菌群体感应基因开关系统及其表达载体、工程菌和应用，该系统包括粪肠球菌的七肽信息素cCF10基因ccfa，负调控信息素肽基因prgx和启动子序列Pprgq。本发明基因开关系统是一种不依赖诱导剂，可以自发动态调节靶基因表达的基因开关系统，并利用该系统构建可以在OD600到1的状态下启动靶基因表达的发酵工程菌，本发明的启动强度与目前常用的费氏弧菌群体感应系统相比高出10倍。本发明将基因元件分别构建到不同的表达载体上，在工程菌内部构建了一个基因开关系统，具有自发动态调节发酵菌株代谢流，控制基因表达的功能，可以避免诱导剂的添加，节约发酵成本，简化发酵流程。
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公开(公告)号：CN110747217B
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN201911068687.1
申请日：2019-11-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一个基于费氏弧菌群体感应系统和T7表达系统的迭代基因电路，该基因电路包括费氏弧菌的信号分子蛋白基因luxI，受体蛋白基因luxR、感应信号分子受体蛋白复合体的启动子序列PluxI(1)、T7 RNA聚合酶基因T7 RNApoly和用于表征电路强度的绿色荧光蛋白egfp。本发明基因电路是一种不依赖诱导剂，可以在任意宿主菌中利用T7表达系统自发强力启动靶基因表达的基因电路；本发明将基因元件分别构建到不同的表达载体上，在工程菌内部构建了一个迭代基因电路，利用T7表达系统放大费氏弧菌群体感应系统的信号，具有利用T7表达系统自发强力启动靶基因表达的功能并具有更低的渗漏比例和更高的启动强度。
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公开(公告)号：CN112391396A
公开(公告)日：2021-02-23
申请号：CN202011082793.8
申请日：2020-10-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种构建于大肠杆菌中的粪肠球菌群体感应基因开关系统及其表达载体、工程菌和应用，该系统包括粪肠球菌的七肽信息素cCF10基因ccfa，负调控信息素肽基因prgx和启动子序列Pprgq。本发明基因开关系统是一种不依赖诱导剂，可以自发动态调节靶基因表达的基因开关系统，并利用该系统构建可以在OD600到1的状态下启动靶基因表达的发酵工程菌，本发明的启动强度与目前常用的费氏弧菌群体感应系统相比高出10倍。本发明将基因元件分别构建到不同的表达载体上，在工程菌内部构建了一个基因开关系统，具有自发动态调节发酵菌株代谢流，控制基因表达的功能，可以避免诱导剂的添加，节约发酵成本，简化发酵流程。
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公开(公告)号：CN110747217A
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201911068687.1
申请日：2019-11-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一个基于费氏弧菌群体感应系统和T7表达系统的迭代基因电路，该基因电路包括费氏弧菌的信号分子蛋白基因luxI，受体蛋白基因luxR、感应信号分子受体蛋白复合体的启动子序列PluxI(1)、T7 RNA聚合酶基因T7 RNApoly和用于表征电路强度的绿色荧光蛋白egfp。本发明基因电路是一种不依赖诱导剂，可以在任意宿主菌中利用T7表达系统自发强力启动靶基因表达的基因电路；本发明将基因元件分别构建到不同的表达载体上，在工程菌内部构建了一个迭代基因电路，利用T7表达系统放大费氏弧菌群体感应系统的信号，具有利用T7表达系统自发强力启动靶基因表达的功能并具有更低的渗漏比例和更高的启动强度。
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公开(公告)号：CN110527693A
公开(公告)日：2019-12-03
申请号：CN201910583354.6
申请日：2019-06-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/78 , C12N15/113 , C12N1/21 , C12R1/385
Abstract: 本发明公开了一种基于铜绿假单胞菌群体感应系统的基因开关系统及其应用，该基因开关系统包括铜绿假单胞菌的信号分子蛋白基因lasI，受体蛋白基因lasR和可以感应信号分子受体蛋白复合体的启动子序列PlasI。本发明基因开关系统是一种不依赖诱导剂，可以自发动态调节靶基因表达的基因开关系统，并利用该系统构建可以在合适的OD600状态下启动靶基因表达的发酵工程菌。本发明将基因元件分别构建到不同的表达载体上，本发明在工程菌内部构建了一个基因开关，具有自发动态调节发酵菌株代谢流，控制基因表达的功能，可以避免诱导剂的添加，节约发酵成本，简化发酵流程。
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